Методы диагностики и исследований паразитарных болезней

Основой диагностики паразитарных болезней, в частности гельминтозов, являются результаты лабораторных исследований, которые выявляют непосредственно возбудителей, их антигены или антитела к ним.

Гельминтозы развиваются в результате инвазии (заражения) организма окончательного хозяина (человека или животного), используемого как место обитания гельминтов и источника их питания. Часто болезни протекают без выраженных специфических клинических симптомов, что не всегда позволяет поставить диагноз по клинической картине.

Диагностика гельминтозов должна быть комплексной и основываться на данных эпидемиологического анамнеза, клиники заболевания и лабораторных исследований.

Специфика биологии каждого конкретного вида гельминта диктует необходимость различной тактики лабораторных исследований, которая направлена на обнаружение в одних случаях гельминтов или их фрагментов, а в других – их личинок, яиц или специфических иммуноглобулинов.

Материал для исследования берется в зависимости от подозрения на наличие у больного того или иного гельминтоза, так как пути выделения яиц, личинок или фрагментов паразитов из организма человека могут быть разными.

Для геогельминтов характерен кишечный (интестинальный) путь выделения яиц и личинок из организма больного человека. Большинство гельминтов, яйца которых выводятся через кишечник, паразитируют в пищеводе, желудке, кишечнике, а также попадают в кишечник при миграции через легкие, бронхи, трахеи, гортань, когда происходит заглатывание яиц и личинок со слизью при кашле. Этот путь присущ трематодам, цестодам и многим нематодам (в частности, геогельминтам). Материалом для исследования служат фекалии (кал). При исследовании проб фекалий обнаруживаются яйца и личинки многих гельминтов.

Паразитологические методы лабораторных исследований применяются:

с диагностической целью;
для контроля эффективности лечения;
для оценки качества проведенного комплекса лечебно-профилактических мероприятий;
для установления уровня пораженности населения (при профосмотрах)

Лабораторная диагностика является важным методом при паразитарных заболеваниях. В то же время качество лабораторной диагностики зависит от множества факторов, таких как надлежащая подготовка пациента к лабораторному обследованию, правильный забор материала для исследования и выбор оптимальной методики, квалификация и опыт специалиста-лаборанта.

Для верификации диагноза важно обеспечить следующее:

сбор данных эпидемиологического анамнеза;
определение соответствующего материала для исследования, правильно собранного и доставленного вовремя;
выбор и применение соответствующего метода идентификации паразита;
правильная идентификация паразита;
правильная интерпретация результатов исследования.

Cбор материала для гельминтологических исследований включает следующие шаги:

Для исследования собирают фекалии из любой чистой емкости немедленно после дефекации.
Не допускается сбор образцов фекалий из унитаза.
Для детей возможен сбор образца с пеленки, подгузника или горшка.
Используя ложку в крышке контейнера, собрать не менее чем из трех точек стула.
Испражнения для анализов должны доставляться в лабораторию не позднее одних суток после дефекации, а при подозрении на стронгилоидоз – немедленно.
Если по каким-либо причинам доставка в лабораторию затруднена, то необходимо хранить материал при температуре +4–8 °C. Рекомендуется использование консерванта, и тогда исследование можно проводить в течение 3–10 дней после дефекации.

Методы лабораторной диагностики гельминтозов

Методы гельминтологических исследований делятся на прямые и опосредованные (косвенные).

Прямые методы: выявление самих гельминтов, их фрагментов, яиц, личинок в фекалиях, моче, дуоденальном секрете, мокроте и др.

Опосредованные (косвенные) методы: выявление вторичных изменений, возникающих в организме человека в результате жизнедеятельности паразита, путем серологических реакций, общего исследования крови, мочи.

Основным методом лабораторной диагностики глистных инвазий является обнаружение яиц или личинок гельминтов в фекалиях. Наиболее распространенными методами исследования фекалий являются гельминтокопроскопические.

Гельминтокопроскопия – это совокупность методов взятия, обработки и исследования (макро- и микроскопического) проб фекалий человека с целью обнаружения в них яиц, личинок гельминтов, их фрагментов. Она включает следующие виды исследований:

копроовоскопия (исследование фекалий на яйца гельминтов);
копроларвоскопия (исследование фекалий на личинки гельминтов);
макроскопия фекалий (обнаружение фрагментов или зрелых гельминтов в фекалиях).

Микроскопические методы подразделяются на простые, сложные и специальные.

К простым относятся метод нативного мазка и метод толстого мазка под целлофаном по Като – Кац.

Сложные методы, или методы обогащения, основаны на феномене разных удельных весов яиц гельминтов и применяемых реагентов. При обработке фекалий этими растворами происходит концентрация яиц на поверхности раствора или в осадке, в результате чего увеличивается эффективность поиска.

Различают следующие методы обогащения:

флотационные (когда используют солевые растворы, удельный вес которых выше удельного веса яиц гельминтов, в результате чего они всплывают в поверхностную пленку, которую и исследуют);
седиментационные (когда используют растворы, удельный вес которых меньше удельного веса яиц гельминтов, в результате чего они оседают, образуя осадок).

Методом седиментации возможно определить следующие гельминтозы: описторхоз, клонорхоз, фасциолез, дикроцелиоз, метагонимоз, нанофиетоз, дифиллоботриоз, гименолепидоз, аскаридоз, трихоцефалез, анкилостомидозы, стронгилоидоз, трихостронгилез, некатороз, шистосомоз, кишечные протозоозы (лямблиоз,криптоспоридиоз, изоспороз)

Специальные методы чаще всего необходимы для обнаружения личинок гельминтов. Группа специальных методов направлена на диагностику конкретного геогельминтоза, применяемый метод специфичен только для данного гельминта.

Модификация эфир-формалинового метода седиментации
одноразовыми системами для проведения копрологического исследования

С развитием паразитологии в лечебную практику стали применяться одноразовые системы для копрологического исследования, предназначенные для эффективного концентрирования яиц и личинок гельминтов модифицированным эфир-формалиновым методом.

Системы для копрологического исследования являются одноразовыми и состоят из нескольких элементов:

пробирка для образца, в которую имеется готовая смесь для фиксации образца фекалий и последующей седиментации
пробирка с системой фильтров и шпателем для забора образца;
коническая емкость для сбора отфильтрованного материала.

Система фильтров способствует оседанию грубых частиц непереваренной пищи и клетчатки в смесительной камере, а жидкая часть с выделившимися в нее паразитами, яйцами паразитов под давлением фильтруется и центрифугируется в конической пробирке.

После получения взвеси систему помещают в центрифугу и центрифугируют при скорости 2500–3000 об/мин в течение 1–3 минут, при скорости 1500 об/мин – 5 минут. В конической части пробирки остается жидкая часть пробы с выделившимися в нее яйцами гельминтов, цистами простейших. Отсоединяют модуль с фильтром и утилизируют после обеззараживания. Коническая часть пробирки остается для микроскопирования. Для этого из нижней части пробирки с помощью пипетки переносят на предметное стекло 2 капли пробы осадка. Микроскопируют при увеличении: окуляр x10, объективы x10, x40.

Преимущества использования одноразовых систем для копрологических исследований:

повышает выявляемость возбудителей;
уменьшает расход реагентов;
снижает опасность контаминации, исключая контакт персонала с исследуемыми образцами;
улучшает стандартизацию метода, повышает достоверность анализа;
исключает подготовку и повторную обработку посуды, а также сокращает количество отходов в процессе проведения исследования

Paraclin® S (Параклин С) Реагенты in vitro для проведения копрологических исследований

Список литературы:

Гельминтные инфекции, передаваемые через почву. Информационный бюллетень ВОЗ № 366, май 2014 г. Женева: Всемирная организация здравоохранения; 2014 (https://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs366/ru/, по состоянию на 1 февраля 2017 г
Бивер П.К. Борьба с гельминтами, передающимися через почву. Женева: Всемирная организация здравоохранения; 1961 (https://apps.who.int/iris/bitstream/10665/86146/1/WHO_PHP_10_rus.pdf, по состоянию на 1 февраля 2017 г.).
Давидянц В.А., Пашинян Э.Р. Клинико-лабораторная диагностика гельминтозов. Москва; 1990.
Основные методы лабораторной диагностики паразитарных болезней. Женева: Всемирная организация здравоохранения; 1994 (https://extranet.who.int/iris/restricted/bitstream/10665/141252/1/522503…, по состоянию на 1 февраля 2017 г.).
Паразитарные болезни человека (протозоозы и гельминтозы). Руководство для врачей. Под ред. В.П. Сергиева, Ю.В. Лобзина, С.С. Козлова. 3-е изд. Санкт-Петербург: Фолиант; 2016.

Источник

Паразитами, согласно определению, называются те организмы, которые постоянно или временно живут за счет других организмов и используют их как место обитания и источник питания, нанося, тем самым, вред здоровью «хозяина». Паразиты очень разнообразны, широко распространены в природе, поражают и животных, и человека. Некоторые из них на разных стадиях развития могут переходить от «хозяина» одного биологического вида к другому. Наиболее общими проявлениями всех паразитарных заболеваний являются существенное снижение иммунной защиты организма, развитие аллергических реакций, нарушение функции внутренних органов, вызванное механическим повреждением. Ухудшается всасывание пищевых веществ и витаминов, снижается работоспособность; у детей может замедлиться физическое развитие.

Заражение человека паразитами чаще всего происходит при употреблении в пищу овощей и фруктов, загрязненных фекалиями, сырого или полусырого мяса, рыбы. Яйца гельминтов могут попасть в рот с грязных рук после общения с животными. Возможна передача от человека человеку, а также повторное и многократное самозаражение. Некоторые паразиты переносятся насекомыми.

В диагностике паразитарных заболеваний (так называемых инвазий) ведущая роль отведена лабораторным методам исследования. Медицинские анализы, позволяющие обнаружить присутствие паразитов в организме человека, можно разделить на две группы – прямые и косвенные.

Прямые методы позволяют выявить одноклеточных паразитов, их цисты («формы покоя» в защитной оболочке), зрелые формы гельминтов, их яйца, личинки НЕПОСРЕДСТВЕННО в среде обитания. Выбор материала, который берут у человека для исследования, зависит от локализации паразита в организме. Это может быть кал, моча, мокрота, содержимое двенадцатиперстной кишки и т.д. В связи с тем, что многие простейшие (одноклеточные паразиты, например, лямблии) и гельминты (черви, например, аскариды, цепни) паразитируют в кишечнике человека и связанных с ним органах, а их яйца выделяются с испражнениями, наибольшее применение имеет метод исследования фекалий под микроскопом.

С целью обнаружения живых форм одноклеточных организмов (простейших) можно использовать только свежий материал – исследование будет результативным, если кал доставлен в лабораторию не позднее, чем через 20-30 минут после опорожнения кишечника.

Цисты простейших, зрелые формы гельминтов и их яйца могут быть обнаружены и в оформленном кале в течение одних суток. С целью повышения достоверности полученных результатов рекомендуется несколько раз повторить исследование – ежедневно или с промежутком в 2-3 дня, т.к. цисты и яйца выделяются в фекалии крайне неравномерно.

Результативность анализов также повышается при использовании специальных методов обогащения. Например, исследование кала с применением современной системы «ПАРАСЕП» предполагает использование специальных фильтров, предназначенных для концентрирования яиц и цист в исследуемом образце, что значительно увеличивает выявляемость паразитов.

Для диагностики энтеробиоза (заболевания, вызываемого острицами и проявляющегося сильным зудом в области анального отверстия) используют материал, полученный при соскобе со складок кожи вокруг ануса. Эту процедуру проводят утром до дефекации или после дневного сна.

Косвенные методы лабораторной диагностики основаны на изучении реакции иммунной системы человека. Эти методы особенно ценны в тех случаях, когда материал, в котором можно обнаружить паразита, трудно получить от пациента (например, ткань печени или легкого при поражении эхинококком) или нет возможности провести анализ в короткие сроки (например, исследование кала в сжатые сроки при диагностике лямблиоза). Присутствие паразитов в организме вызывает образование специальных защитных белков-антител (иммуноглобулинов Ig). Обнаружение специфических антител в крови может свидетельствовать о наличии заболевания.

Возможности иммунологических методов (анализов крови) в диагностике паразитарных инвазий имеют определенные ограничения. Иммунной системе человека требуется достаточно длительное время для выработки антител против паразитов. Первые антитела появляются в русле крови спустя 2-3 недели после заражения; обнаружить присутствие паразитов до истечения этого периода зачастую не удается. И наоборот, после выздоровления пациента иммуноглобулины могут длительно циркулировать в крови. Поэтому выявление антител в сыворотке крови всего лишь указывает на возможное заражение. Для того чтобы подтвердить предполагаемый диагноз, а также оценить течение заболевания, иногда требуется выполнение повторных анализов с интервалом в 10-14 дней.

Паразитарные заболевания человека очень разнообразны. Подробно ответить на Ваши вопросы о перечне выполняемых исследований и правильно оценить полученные результаты Вам помогут специалисты лаборатории KDL.

88. Популяционный уровень взаимодействия паразитов и хозяев. Типы, принципы регуляции и механизмы устойчивости системы «паразит-хозяин».

Популяции как хозяев, так и паразитов являются обязательными членами биогеоценозов, устойчивость которых зависит, в частности, от видового разнообразия живых организмов, входящих в их состав. Паразиты в экосистемах являются консументами второго и третьего порядков и играют существенную роль в биотическом круговороте веществ. Даже самые патогенные из них, вызывающие гибель большого числа особей хозяев, выступают, с одной стороны, как стабилизаторы численности хозяев, периодически изымая из популяций избыток организмов, который мог бы привести к нарушению экологического баланса. С другой стороны, наиболее тяжелое течение паразитарных заболеваний обычно наблюдается у особей с ослабленным иммунитетом, страдающих наследственными дефектами или с врожденной предрасположенностью к аллергическим реакциям. Гибель именно этих организмов оказывает на генетическую структуру популяций хозяина благотворную роль, элиминируя из его аллелофон-да аллели, снижающие жизнеспособность. Таким образом, взаимоотношения между популяциями хозяев и паразитов в условиях конкретных биогеоценозов способствуют их устойчивости и одновременно выступают как фактор естественного отбора, снижая неспецифический генетический груз популяции хозяина.
Кроме того, утрата биогеоценозами наиболее восприимчивых к заражению паразитами особей хозяина сопровождается и уничтожением части паразитарной популяции, гибнущей вместе с ним. Это обеспечивает активизацию микроэволюционных процессов в оставшейся части популяции паразитов, способствуя в конечном счете появлению у них новых адаптации.
В популяциях хозяина паразиты распределяются не равномерно, а перерассеянно. Это означает, что в меньшей части популяции хозяина сосредоточена большая часть популяции паразита.
Данная особенность имеет принципиальное значение для выживания хозяев, так как сводит к минимуму результаты массированных инвазий их паразитами, сохраняя основное ядро популяции интакт-ным. Перерассеянное распределение паразита в популяции хозяина необходимо учитывать при проведении профилактических мероприятий. Действительно, для выживания популяции паразита и передачи ее следующему поколению хозяев нередко важными оказываются лишь несколько особей или даже один организм, несущий в себе очень большое число паразитов.
Действие паразита на хозяина. Паразит обычно оказывает вредоносное действие на хозяина, вызывая его заболевание. Такое свойство паразита называют патогенность.Формы воздействия паразита на хозяина весьма разнообразны:
• механическое воздействие — повреждение тканей органами прикрепления (крючья, присоски) или частями ротового аппарата паразита, закупорка просвета кишечника или протоков печени и др.;
• токсическое действие оказывают продукты жизнедеятельности паразита, что проявляется в потере аппетита у больного, потере веса, тошноте, рвоте и других симптомах.
Питание паразитов происходит за счет хозяина. Поглощая тканевую жидкость, ткани, кровь, а так же переваренную пищу, паразиты вызывают резкое истощение больного, тяжелое малокровие.
Действие хозяина на паразита. Организм хозяина также оказывает влияние на паразита, направленное на подавление его жизнедеятельности или уничтожение. Ответные реакции можно разделить на клеточные, тканевые (местные), гуморальные (общие).
Клеточная реакция проявляется в увеличении размеров клетки. Эритроциты, пораженные малярийным плазмодием, заметно крупнее «здоровых».
Тканевая реакция проявляется в образовании вокруг покоящейся стадии паразита соединительнотканной капсулы, которая изолирует паразита от окружающей среды.
Гуморальная реакция — иммунологический ответ организма, который заключается в выработке антител на вырабатываемые паразитом антигены.

Источник

Второе врачебное мнение

Эксперты из ведущих российских и зарубежных медицинских
учреждений дадут свое заключение по результатам анализов
и обследований, прокомментируют поставленный ранее диагноз
и назначенное лечение.

Узнать больше

Источник