Набор для выявления антител к вирусу ньюкаслской болезни в реакции торможения
Âíèìàíèå! Ýòîò ñïðàâî÷íèê äîñòóïåí íà CD. Ïîäðîáíàÿ èíôîðìàöèÿ îáî âñåõ ïðåïàðàòàõ, óäîáíûé ïîèñê, àâòîìàòè÷åñêîå îáíîâëåíèå êàòàëîãà. Ïîäðîáíåå »»
Àëôàâèòíûé óêàçàòåëü
| Ïðåïàðàòû ïî ïðîèçâîäèòåëÿì
| Ïðåïàðàòû ïî çàáîëåâàíèÿì
| Ïîèñê
ÍÀÁÎÐ ÄËß ÂÛßÂËÅÍÈß ÀÍÒÈÒÅË Ê ÂÈÐÓÑÓ ÍÜÞÊÀÑËÑÊÎÉ ÁÎËÅÇÍÈ (ÍÁ)  ÐÅÀÊÖÈÈ ÒÎÐÌÎÆÅÍÈß ÃÅÌÀÃÃËÞÒÈÍÀÖÈÈ (ÐÒÃÀ)
Ñîñòàâ è ôîðìà âûïóñêà
 ñîñòàâ íàáîðà âõîäÿò ñëåäóþùèå êîìïîíåíòû — Èììóíîñïåöèôè÷åñêèå êîìïîíåíòû: ¹ 1 àíòèãåí ñïåöèôè÷åñêèé âèðóñà ÍÁ, ëèîôèëèçèðîâàííûé — ñóõàÿ ïîðèñòàÿ ìàññà áåëîãî èëè ñâåòëî-æåëòîãî öâåòà, 4 ìë — 2 ôëàêîíà; ¹ 2 ãèïåðèììóííàÿ ñûâîðîòêà êðîâè êóð ê âèðóñó ÍÁ (ïîëîæèòåëüíûé êîíòðîëü), öåëüíàÿ, ëèîôèëèçèðîâàííàÿ — ñóõàÿ ïîðèñòàÿ ìàññà áåëîãî èëè ñâåòëî-æåëòîãî öâåòà, 0,5 ìë — 1 ôëàêîí; ¹ 3 íîðìàëüíàÿ ñûâîðîòêà êðîâè êóð (îòðèöàòåëüíûé êîíòðîëü), íå ñîäåðæàùàÿ àíòèòåë ê ÍÁ, öåëüíàÿ, ëèîôèëèçèðîâàííàÿ — ñóõàÿ ïîðèñòàÿ ìàññà áåëîãî èëè ñâåòëî-æåëòîãî öâåòà, 0,5 ìë — 1 ôëàêîí. Íåñïåöèôè÷åñêèå êîìïîíåíòû: ¹ 4 íàáîð ñîëåé äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ çàáóôåðíîãî ôèçèîëîãè÷åñêîãî ðàñòâîðà: íàòðèé õëîðèñòûé, íàòðèé ôîñôîðíîêèñëûé äâóçàìåùåííûé è êàëèé ôîñôîðíîêèñëûé îäíîçàìåùåííûé — ïîðîøîê áåëîãî öâåòà, 10,2 ã — 1 ôëàêîí; ¹ 5 íàòðèé ëèìîííîêèñëûé — ïîðîøîê áåëîãî öâåòà, 3,0 ã — 1 ôëàêîí; ¹ 6 ìèêðîïàíåëè ïîëèñòèðîëîâûå êðóãëîäîííûå äëÿ èììóíîëîãè÷åñêèõ ðåàêöèé, 96 ëóíî÷íûå — 4 øòóêè. Íàáîð ðàññ÷èòàí íà àíàëèç 500 ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè êóð.
Ôàðìàêîëîãè÷åñêèå ñâîéñòâà
Ïðèíöèí ìåòîäà îñíîâàí íà ñïîñîáíîñòè ñûâîðîòîê êðîâè êóð, ñîäåðæàùèõ ñïåöèôè÷åñêèå àíòèòåëà, òîðìîçèòü ãåìàããëþòèíèðóþùóþ àêòèâíîñòü àíòèãåíà ÍÁ.
Ïîêàçàíèÿ
Äëÿ âûÿâëåíèÿ ñïåöèôè÷åñêèõ àíòèòåë ê âèðóñó íüþêàñëñêîé áîëåçíè (ÍÁ) â ñûâîðîòêàõ êðîâè êóð â ðåàêöèè òîðìîæåíèÿ ãåìàããëþòèíàöèè (ÐÒÃÀ) â ìèêðîâàðèàíòå.
Äîçû è ñïîñîá ïðèìåíåíèÿ
Äëÿ ïîñòàíîâêè ðåàêöèè èñïîëüçóþò: îäíî è âîñüìèêàíàëüíûå ïèïåòêè ëþáîé ìîäåëè ñ âàðüèðóåìûì èëè ñòàáèëüíûì îáúåìîì â ïðåäåëàõ 0,025 — 0,05 ìë. Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ çàáóôåðåííîãî ôèçèîëîãè÷åñêîãî ðàñòâîðà ðàñòâîðèòü ñîäåðæèìîå ôëàêîíà ¹4 â 1 ë äèñòèëëèðîâàííîé âîäû. Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ 3% ðàñòâîðà ëèìîíîêèñëîãî íàòðèÿ ðñòâîðèòü ñîäåðæèìîå ôëîêîíà ¹5 â 100 ìë çàáóôåðåííîãî ôèçèîëîãè÷åñêîãî ðàñòâîðà. Ïîäãîòîâêà àíòèãåíà. Àíòèãåí âî ôëàêîíàõ ðåñóñïåíäèðóþò â çàáóôåðííîì ôèçèîëîãè÷åñêîì ðàñòâîðå äî èñõîäíîãî îáúåìà (4 ìë). Ïðèãîòîâëåíèå âçâåñè ýðèòðîöèòîâ ïåòóõà. Êðîâü áåðóò èç ïîäêðûëüöîâîé âåíû âî ôëàêîíû ñ 3% ðàñòâîðîì ëèìîííîêèñëîãî íàòðèÿ íà çàáóôåðåííîì ôèçèîëîãè÷åñêîì ðàñòâîðå ( ðÍ 7,2 — 7,4) â ñîîòíîøåíèè 1 : 2, òðèæäû îòìûâàþò çàáóôåðåííîì ôèçèîëîãè÷åñêîì ðàñòâîðå ïóòåì öåíòðèôóãèðîâàíèÿ ïðè 1500 îá/ìèí. Èç îñàäêà ýðèòðîöèòîâ íà çàáóôåðåííîì ôèçèîëîãè÷åñêîì ðàñòâîðå ( ðÍ 7,2 — 7,4) ãîòîâÿò 0,7 % ñóñïåíçèþ. Äëÿ ýòîãî â 99,3 ìë çàáóôåðåííîãî ôèçèîëîãè÷åñêîãî ðàñòâîðà äîáàâëÿþò 7,7 ìë êîíöåíòðàòà ýðèòðîöèòîâ (îñàäîê). Õðàíèòü ñóñïåíçèþ ìîæíî â óñëîâèÿõ õîëîäèëüíèêà (+4 °Ñ) äî ïîÿâëåíèÿ ïðèçíàêîâ ãåìîëèçà ýðèòðîöèòîâ. Ïîëó÷åíèå ñûâîðîòêè êðîâè. Êðîâü áåðóò èç ïîäêðûëüöîâîé âåíû èëè ïóòåì ñêàðèôèêàöèè ãðåáíÿ, ñîáèðàþò â ñòåðèëüíûå ïðîáèðêè, ïðåäâàðèòåäüíî óâëàæíåííûå ñòåðèëüíûì ôèçèîëîãè÷åñêèì ðñòâîðîì. Îáðàçîâàâøèéñÿ ñãóñòîê îòäåëÿþò îò ñòåíîê òîíêèì ìåòàëëè÷åñêèì ñòåðæíåì èëè ïàñòåðîâñêîé ïèïåòêîé è âûäåðæèâàþò ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå (18 — 20 °Ñ) â òå÷åíèå 12 — 18 ÷àñîâ èëè ïðè òåìïåðàòóðå 37 °Ñ (â òåðìîñòàòå) â òå÷åíèí 60 ìèí, à çàòåì 8 — 10 ÷ ïðè +4 °Ñ (â õîëîäèëüíèêå). Îòñòîÿøóþñÿ ñûâîðîòêó ñëèâàþò â ÷èñòûå ïðîáèðêè è èññëåäóòñÿ â ÐÒÃÀ. Äëÿ óäàëåíÿ òåðìîëèáèëüíûõ èíãèáèòîðîâ ñûâîðîòêó êðîâè ïðîãðåâàþò â âîäÿíîé áàíå ïðè 56 °Ñ â òå÷åíèå 30 ìèíóò ÐÒÃÀ ïðîâîäÿò â äâà ýòàïà: îïðåäåëííèå ãåìàããëþòèíèðóþùåãî òèòðà àíòèãåíà â ðåàêöèè ãåìàããëþòèíàöèè (ÐÃÀ) äëÿ ðàñ÷åòà ðàáî÷åé äîçû; îïðåäåëåíèå òèòðà àíòèòåë â ïðîáàõ ñûâîðîòêè êðîâè. Ïîñòàíîâêà ðåàêöèè ãåìàããëþòèíàöèè — äëÿ ïîñòàíîâêè ÐÃÀ ãîòîâÿò äâóêðàòíûå ðàçâåäåíèÿ àíòèãåíà îò 1 : 2 äî 1 : 4096. Ñ ýòîé öåëüþ âî âñå ëóíêè ïîëèñòèðîëîâîé ïàíåëè ïèïåòêîé ðàçëèâàþò çàáóôåðåííûé ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð (0,05 èëè 0,025 ìë), â ïåðâóþ âíîñÿò ðàâíûé îáúåì àíòèãåíà, òðåõêðàòíî ïèïåòèðóþò è ïåðåíîñÿò ïî 0,05 èëè 0,025 ìë âî âòîðóþ ëóíêó è ò. ä. Èç ïîñëåäíåé ëóíêè óäàëÿþò ïî 0,05 èëè 0,025 ìë ñîîòâåòñòâåííî. Ïîñëå ðàçâåäåíèÿ àíòèãåíà âî âñå ëóíêè âíîñÿò 0,7 % ñóñïåíçèþ ýðèòðîöèòîâ ïåòóõà â îáúåìå, ðàâíîì èñõîäíîìó îáúåìó çàáóôåðåííîãî ôèçèîëîãè÷åñêîãî ðàñòâîðà. Ìèêðîïàíåëè àêêóðàòíî âñòðÿõèâàþò è îñòàâëÿþò ïðè êîìíàòíîé òåìïåðàòóðå (18 — 20 °Ñ). Ó÷åò ðåàêöèè ïðîâîäÿò ïîñëå îñåäàíèÿ ýðèòðîöèòîâ â êîíòðîëå. Äëÿ êîíòðîëÿ ýðèòðîöèòîâ íà ñïîíòàííóþ ãåìàããëþòèíàöèþ è îïðåäåëåíèÿ âðåìåíè ó÷åòà ðåàêöèè â äâå ëóíêè ñ çàáóôåðåííûì ôèçèîëîãè÷åñêèì (0,05 èëè 0,025 ìë) äîáàâëÿþò ðàâíûé îáúåì ýðèòðîöèòîâ ÐÃÀ îöåíèâàþò ïîëîæèòåëüíî ïðè îñåäàíèè ýðèòðîöèòîâ â âèäå õîðîøî âûðàæåííîãî , îòðèöàòåëüíî — â âèäå . Çà òèòð àíòèãåíà ïðèíèìàþò åãî íàèáîëüøåå ðàçâåäåíèå, ïîêàçûâàþùåå ÷åòêî âûðàæåííóþ àããëþòèíàöèþ â âèäå . (Ïðèìå÷àíèå: Ïîëó÷åíèå íå÷åòêèõ ðåçóëüòàòîâ ìîæåò áûòü ñâÿçàíî ñ èçìåíèâøèìñÿ ðÍ çàáóôåðåííîãî ôèçèîëîãè÷åñêîãî ðàñòâîðà.). Äëÿ ïîñòàíîâêè ÐÒÃÀ ãîòîâÿò ðàáî÷óþ äîçó àíòèãåíà (4 ÃÀÅ), èñõîäÿ èç åãî òèòðà. Äëÿ ýòîãî èñõîäíûé àíòèãåí ðàçâîäÿò çàáóôåðåííûì ôèçèîëîãè÷åñêèì ðàñòâîðîì âî ñòîëüêî ðàç, ñêîëüêî ïîëó÷àþò îò äåëåíèÿ åãî òèòðà íà 4. Íàïðèìåð: òèòð àíòèãåíà 1 : 256. Äëÿ ïðèãîòîâëåíèÿ ðàáî÷åãî ðàçâåäåíèÿ íåîáõîäèìî âçÿòü 63 ìë çàáóôåðåííîãî ôèçèîëîãè÷åñêîãî ðàñòâîðà è 1 ìë èñõîäíîãî àíòèãåíà (256 : 4 =64). Îáúåì ðàáî÷åé äîçû àíòèãåíà îïðåäåëÿþò, èñõîäÿ èç êîëè÷åñòâà ïîäëåæàùèõ èññëåäîâàíèþ ñûâîðîòîê. Äëÿ ïîñòàíîâêè ÐÒÃÀ ìèêðîìåòîäîì íà èññëåäîâàíèå 1 ñûâîðîòêè â 12 ðàçâåäåíèÿõ òðåáóåòñÿ 0,6 èëè 0,3 ìë 4 ÃÀÅ àíòèãåíà (â çàâèñèìîñòè îò ïåðâîíà÷àëüíîãî îáúåìà çàáóôåðåííîãî ôèçèîëîãè÷åñêîãî ðàñòâîðà). Ðàáî÷óþ äîçó àíòèãåíà ãîòîâÿò íåïîñðåäñòâåííî â äåíü ïîñòàíîâêè ðåàêöèè ñ îáÿçàòåëüíûì êîíòðîëåì 4 ÃÀÅ. Äëÿ ýòîãî â 4 ëóíêè ðàçëèâàþò çàáóôåðåííûé ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð â îáúåìàõ, âûáðàííûõ äëÿ ïîñòàíîâêè ðåàêöèè.  ïåðâûé äîáàâëÿþò ðàâíûé îáúåì ðàáî÷åé äîçû àíòèãåíà è òèòðóþò ñîãëàñíî âûøåîïèñàííîé ñõåìå. Ó÷åò ðåàêöèè ïðîâîäÿò ïîñëå îñåäàíèÿ ýðèòðîöèòîâ â êîíòðîëå. Ïðè ïðàâèëüíîì îïðåäåëåíèè ðàáî÷åé äîçû â ïåðâîé, âòîðîé ëóíêàõ äîëæíà áûòü ïîëíàÿ àããëþòèíàöèÿ (), â òðåòüåé ÷àñòè÷íàÿ, â ÷åòâåðòîé — îòñóòñòâèå àããëþòèíàöèè (). Ïîëíàÿ àããëþòèíàöèÿ â òðåòüåé ëóíêå îçíà÷àåò, ÷òî äîçà àíòèãåíà çàâûøåíà, à îòñóòñòâèå àããëþòèíàöèè â ïåðâîé èëè âî âòîðîé ëóíêàõ — ñâèäåòåëüñòâóþò î íåäîñòàòî÷íîì åãî êîëè÷åñòâå. Êîððåêòèðîâàíèå ðàáî÷åé äîçû (óâåëè÷åíèå èëè óìåíüøåíèå) ïðîâîäÿò ïóòåì äîáàâëåíèÿ àíòèãåíà èëè çàáóôåðåííîãî ôèçèîëîãè÷åñêîãî ðàñòâîðà ñ îáÿçàòåëüíûì ïîâòîðíûì êîíòðîëåì 4 ÃÀÅ. Ïîñòàíîâêà ÐÒÃÀ — Äëÿ ïîñòàíîâêè ðåàêöèè âî âñå ëóíêè ïîëèñòèðîëîâîé ïëàíøåòû âíîñÿò çàáóôåðåííûé ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð â îáúåìå 0,05 (0,025) ìë. Çàòåì â ïåðâóþ ëóíêó äîáàâëÿþò ðàâíûé îáúåì èñïûòóåìîé ñûâîðîòêè, òðèæäû ïèïåòèðóþò è ãîòîâÿò ðÿä ïîñëåäîâàòåëüíûõ äâóêðàòíûõ ðàçâåäåíèè (ñ 1 : 2 äî 1 : 4096). Ïîñëå ýòîãî, âî âñå ëóíêè âíîñÿò ðàáî÷åå ðàçâåäåíèå àíòèãåíà â îáúåìå 0,05 (0,025) ìë, îñòîðîæíî âñòðÿõèâàþò è ïîñëå 20 — 30 ìèíóò êîíòàêòà ñûâîðîòêè ñ àíòèãåíîì â êàæäóþ ëóíêó äîáàâëÿþò äâîéíîé îáúåì (ïî îòíîøåíèþ ê îáúåìó çàáóôåðåííîãî ôèçèîëîãè÷åñêîãî ðàñòâîðà) ñóñïåíçèè ýðèòðîöèòîâ. Êîíòðîëè: ñûâîðîòêè íà èçîàããëþòèíàöèþ (ñûâîðîòêà + çàáóôåðåííûé ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð â ðàâíûõ îáúåìàõ + 0,7 % ñóñïåíçèÿ ýðèòðîöèòîâ â äâîéíîì îáúåìå). Àããëþòèíàöèÿ äîëæíà îòñóòñòâîâàòü; ýðèòðîöèòîâ íà ñïîíòàííóþ àããëþòèíàöèþ (ñóñïåíçèÿ ýðèòðîöèòîâ + çàáóôåðåííûé ôèçèîëîãè÷åñêèé ðàñòâîð â ðàâíûõ îáúåìàõ). Àããëþòèíàöèÿ äîëæíà îòñóòñòâîâàòü; ïîëîæèòåëüíîé ñïåöèôè÷åñêîé ñûâîðîòêè (ïîëîæèòåëüíîãî êîíòðîëÿ). Òèòð êîíòðîëüíîé ïîëîæèòåëüíîé ñûâîðîòêè óêàçàí íà ôëàêîíå + îäíî ðàçâåäåíèå. Ðåàêöèþ ó÷èòûâàþò ÷åðåç 25 — 40 ìèíóò. Ïðè íàëè÷èè â ñûâîðîòêå àíòèòåë íàáëþäàþò òîðìîæåíèå ãåìàããëþòèíàöèè — ýðèòðîöèòû âûïàäàþò â îñàäîê â âèäå . Òèòðîì ñûâîðîòêè — ñ÷èòàþò íàèáîëüøåå åå ðàçâåäåíèå, äàþùåå ïîëíîå òîðìîæåíèå ãåìàããëþòèíàöèè ðàáî÷åé äîçû àíòèãåíà ÍÁ. Èíòåðïðåòàöèÿ ïîëó÷åííûõ ðåçóëüòàòîâ: Ïî ðåçóëüòàòàì ÐÒÃÀ îïðåäåëÿþò ýôôåêòèâíîñòü èììóíèçàöèè â ïàðòèè ïðèâèòûõ öûïëÿò ïóòåì äåëåíèÿ ñóììàðíîãî êîëè÷åñòâà ïðîá ñ òèòðîì àíòèòåë 1 : 8 è âûøå (ïîñëå ïðèìåíåíèÿ æèâûõ âàêöèí) èëè 1 : 16 (ïîñëå ïðèìåíåíèÿ èíàêòèâèðîâàííûõ âàêöèí) íà îáùåå ÷èñëî èññëåäîâàííûõ ñûâîðîòîê è âûðàæàþò â ïðîöåíòàõ. Ïòèöó ñ÷èòàþò íåâîñïðèèì÷èâîé ê ÍÁ ïðè ýôôåêòèâíîñòè èììóíèçàöèè 80 è áîëåå ïðîöåíòîâ ïîñëå ïðèìåíåíèÿ æèâûõ âèðóñâàêöèí è 90 è áîëåå ïðîöåíò
îâ ïîñëå èñïîëüçîâàíèÿ èíàêòèâèðîâàííûõ ïðåïàðàòîâ. Ïðè ýôôåêòèâíîñòè èììóíèçàöèè ìåíåå 80 % ïîñëå ïðèìåíåíèÿ æèâûõ âèðóñâàêöèí è ìåíåå 90 % ïîñëå ïðèìåíåíèÿ èíàêòèâèðîâàííûõ âèðóñâàêöèí ïòèöà ïîäëåæèò ïîâòîðíîé âàêöèíàöèè. Îáíàðóæåíèå â ÐÒÃÀ âûñîêîãî òèòðà àíòèòåë (1 : 2048 è âûøå ó ïòèö, ïðèâèòûõ æèâûìè âàêöèíàìè, è 1 : 4096 è âûøå ó ïòèö, ïðèâèòûõ èíàêòèâèðîâàííûìè âàêöèíàìè) ñâèäåòåëüñòâóåò î âîçìîæíîé öèðêóëÿöèè â ñòàäå ïîëåâîãî âèðóñà íüþêàñëñêîé áîëåçíè.  òàêèõ ñëó÷àÿõ ÷åðåç 21 — 30 ñóòîê ïðîâîäÿò ïîâòîðíîå èññëåäîâàíèå ïðîá ñûâîðîòîê êðîâè, ïîëó÷åííûõ îò ýòèõ æå ïòèö. Ñíèæåíèå èëè ñòàáèëèçàöèÿ óðîâíÿ àíòèòåë è (èëè) óìåíüøåíèå êîëè÷åñòâà ïòèö ñ âûñîêèì óðîâíåì àíòèòåë ïðè ïîâòîðíûõ èññëåäîâàíèÿõ ïðîá ñûâîðîòêè êðîâè ñâèäåòåëüñòâóåò îá îòñóòñòâèè öèðêóëÿöèè â õîçÿéñòâå ýïèçîîòè÷åñêîãî âèðóñà è ÿâëÿåòñÿ ñëåäñòâèåì ïîñòâàêöèíàëüíûõ ðåàêöèé. Íàðàñòàíèå òèòðîâ è (èëè) óâåëè÷åíèå êîëè÷åñòâà ïòèö ñ âûñîêèì óðîâíåì àíòèòåë ïðè îòñóòñòâèè êëèíè÷åñêèõ è ïàòîëîãîàíàòîìè÷åñêèõ ïðèçíàêîâ ÍÁ íå ÿâëÿåòñÿ îñíîâàíèåì äëÿ îáúÿâëåíèÿ õîçÿéñòâà íåáëàãîïîëó÷íûì ïî äàííîìó çàáîëåâàíèþ, íî ïðåäóñìàòðèâàåò óñòàíîâëåíèå çà ïòèöåé òùàòåëüíîãî íàáëþäåíèÿ, ïðîâåäåíèÿ ñèñòåìàòè÷åñêèõ ñåðîëîãè÷åñêèõ è âèðóñîëîãè÷åñêèõ èññëåäîâàíèè. Íàðàñòàíèå òèòðîâ è (èëè) óâåëè÷åíèå êîëè÷åñòâà ïòèö ñ âûñîêèì óðîâíåì àíòèòåë ïðè íàëè÷èè êëèíèêî-ïàòîëîãîàíàòîìè÷åñêèõ ïðèçíàêîâ çàáîëåâàíèÿ ñëóæèò îñíîâàíèåì äëÿ ïðîâåäåíèÿ äåòàëüíîãî ýïèçîîòîëîãè÷åñêîãî îáñëåäîâàíèÿ õîçÿéñòâà è óñòàíîâëåíèÿ îêîí÷àòåëüíîãî äèàãíîçà ïî äàííîìó çàáîëåâàíèþ. Îáíàðóæåíèå àíòèòåë ê âèðóñó íüþêàñëñêîé áîëåçíè ó ïòèö, íå ïðèâèòûõ ïðîòèâ ÍÁ áåç êëèíè÷åñêèõ è ïàòîëîãîàíàòîìè÷åñêèõ ïðèçíàêîâ çàáîëåâàíèÿ ñâèäåòåëüñòâóåò î öèðêóëÿöèè ïîëåâûõ ëåíòîãåííûõ øòàììîâ âèðóñà íüþêàñëñêîé áîëåçíè è íå ÿâëÿåòñÿ îñíîâàíèåì äëÿ îáúÿâëåíèÿ õîçÿéñòâà íåáëàãîïîëó÷íûì ïî ÍÁ. Çà ïòèöåé òàêèõ õîçÿéñòâ óñòàíàâëèâàþò ïîñòîÿííîå íàáëþäåíèå.
Îñîáûå óêàçàíèÿ
Íå ïðåäóñìîòðåíû.
Óñëîâèÿ õðàíåíèÿ
 ñóõîì òåìíîì ìåñòå ïðè òåìïåðàòóðå îò 2 äî 8 °Ñ. Ñðîê ãîäíîñòè — 12 ìåñÿöåâ.
ÏðîèçâîäèòåëüÔåäåðàëüíûé öåíòð îõðàíû çäîðîâüÿ æèâîòíûõ ÔÃÓ (ÂÍÈÈÇÆ ÔÃÓ), Ðîññèÿ
Àäðåñ: 600901, ã. Âëàäèìèð, ìêð. Þðüåâåö.
Òåë.: (4922) 26-06-14
Òåë./ôàêñ: (4922) 26-38-77
E-mail: mail@arriah.ruÏîäðîáíåå î ïðîèçâîäèòåëå
Âñå ïðåïàðàòû ïðîèçâîäñòâà Ôåäåðàëüíûé öåíòð îõðàíû çäîðîâüÿ æèâîòíûõ ÔÃÓ (ÂÍÈÈÇÆ ÔÃÓ), Ðîññèÿ
ÏðîäàâåöÌåñòî Âàøåé ðåêëàìû
Ïî âîïðîñàì ðàçìåùåíèÿ èíôîðìàöèè
î âåòåðèíàðíûõ ïðåïàðàòàõ è êîðìîâûõ äîáàâêàõ
â Ýëåêòðîííîì ñïðàâî÷íèêå «Âåòåðèíàðíûå ïðåïàðàòû â Ðîññèè»
è çàêëþ÷åíèÿ äîãîâîðîâ íà ïóáëèêàöèþ
îáðàùàéòåñü â ÎÎÎ «Âåòòîðã» ïî ýëåêòðîííîé ïî÷òå: vettorg@mail.ru
Источник
Название (рус.)НАБОР ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К ВИРУСУ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ (НБ) В РЕАКЦИИ ТОРМОЖЕНИЯ ГЕМАГГЛЮТИНАЦИИ (РТГА)Состав и форма выпускаВ состав набора входят следующие компоненты — Иммуноспецифические компоненты: № 1 антиген специфический вируса НБ, лиофилизированный — сухая пористая масса белого или светло-желтого цвета, 4 мл — 2 флакона; № 2 гипериммунная сыворотка крови кур к вирусу НБ (положительный контроль), цельная, лиофилизированная — сухая пористая масса белого или светло-желтого цвета, 0,5 мл — 1 флакон; № 3 нормальная сыворотка крови кур (отрицательный контроль), не содержащая антител к НБ, цельная, лиофилизированная — сухая пористая масса белого или светло-желтого цвета, 0,5 мл — 1 флакон. Неспецифические компоненты: № 4 набор солей для приготовления забуферного физиологического раствора: натрий хлористый, натрий фосфорнокислый двузамещенный и калий фосфорнокислый однозамещенный — порошок белого цвета, 10,2 г — 1 флакон; № 5 натрий лимоннокислый — порошок белого цвета, 3,0 г — 1 флакон; № 6 микропанели полистироловые круглодонные для иммунологических реакций, 96 луночные — 4 штуки. Набор рассчитан на анализ 500 проб сывороток крови кур.Фармакологические свойстваПринцин метода основан на способности сывороток крови кур, содержащих специфические антитела, тормозить гемагглютинирующую активность антигена НБ.ПоказанияДля выявления специфических антител к вирусу ньюкаслской болезни (НБ) в сыворотках крови кур в реакции торможения гемагглютинации (РТГА) в микроварианте.Дозы и способ примененияДля постановки реакции используют: одно и восьмиканальные пипетки любой модели с варьируемым или стабильным объемом в пределах 0,025 — 0,05 мл. Для приготовления забуференного физиологического раствора растворить содержимое флакона №4 в 1 л дистиллированной воды. Для приготовления 3% раствора лимонокислого натрия рстворить содержимое флокона №5 в 100 мл забуференного физиологического раствора. Подготовка антигена. Антиген во флаконах ресуспендируют в забуфернном физиологическом растворе до исходного объема (4 мл). Приготовление взвеси эритроцитов петуха. Кровь берут из подкрыльцовой вены во флаконы с 3% раствором лимоннокислого натрия на забуференном физиологическом растворе ( рН 7,2 — 7,4) в соотношении 1 : 2, трижды отмывают забуференном физиологическом растворе путем центрифугирования при 1500 об/мин. Из осадка эритроцитов на забуференном физиологическом растворе ( рН 7,2 — 7,4) готовят 0,7 % суспензию. Для этого в 99,3 мл забуференного физиологического раствора добавляют 7,7 мл концентрата эритроцитов (осадок). Хранить суспензию можно в условиях холодильника (+4 °С) до появления признаков гемолиза эритроцитов. Получение сыворотки крови. Кровь берут из подкрыльцовой вены или путем скарификации гребня, собирают в стерильные пробирки, предваритедьно увлажненные стерильным физиологическим рствором. Образовавшийся сгусток отделяют от стенок тонким металлическим стержнем или пастеровской пипеткой и выдерживают при комнатной температуре (18 — 20 °С) в течение 12 — 18 часов или при температуре 37 °С (в термостате) в теченин 60 мин, а затем 8 — 10 ч при +4 °С (в холодильнике). Отстояшуюся сыворотку сливают в чистые пробирки и исследутся в РТГА. Для удаленя термолибильных ингибиторов сыворотку крови прогревают в водяной бане при 56 °С в течение 30 минут РТГА проводят в два этапа: определнние гемагглютинирующего титра антигена в реакции гемагглютинации (РГА) для расчета рабочей дозы; определение титра антител в пробах сыворотки крови. Постановка реакции гемагглютинации — для постановки РГА готовят двукратные разведения антигена от 1 : 2 до 1 : 4096. С этой целью во все лунки полистироловой панели пипеткой разливают забуференный физиологический раствор (0,05 или 0,025 мл), в первую вносят равный объем антигена, трехкратно пипетируют и переносят по 0,05 или 0,025 мл во вторую лунку и т. д. Из последней лунки удаляют по 0,05 или 0,025 мл соответственно. После разведения антигена во все лунки вносят 0,7 % суспензию эритроцитов петуха в объеме, равном исходному объему забуференного физиологического раствора. Микропанели аккуратно встряхивают и оставляют при комнатной температуре (18 — 20 °С). Учет реакции проводят после оседания эритроцитов в контроле. Для контроля эритроцитов на спонтанную гемагглютинацию и определения времени учета реакции в две лунки с забуференным физиологическим (0,05 или 0,025 мл) добавляют равный объем эритроцитов РГА оценивают положительно при оседании эритроцитов в виде хорошо выраженного , отрицательно — в виде . За титр антигена принимают его наибольшее разведение, показывающее четко выраженную агглютинацию в виде . (Примечание: Получение нечетких результатов может быть связано с изменившимся рН забуференного физиологического раствора.). Для постановки РТГА готовят рабочую дозу антигена (4 ГАЕ), исходя из его титра. Для этого исходный антиген разводят забуференным физиологическим раствором во столько раз, сколько получают от деления его титра на 4. Например: титр антигена 1 : 256. Для приготовления рабочего разведения необходимо взять 63 мл забуференного физиологического раствора и 1 мл исходного антигена (256 : 4 =64). Объем рабочей дозы антигена определяют, исходя из количества подлежащих исследованию сывороток. Для постановки РТГА микрометодом на исследование 1 сыворотки в 12 разведениях требуется 0,6 или 0,3 мл 4 ГАЕ антигена (в зависимости от первоначального объема забуференного физиологического раствора). Рабочую дозу антигена готовят непосредственно в день постановки реакции с обязательным контролем 4 ГАЕ. Для этого в 4 лунки разливают забуференный физиологический раствор в объемах, выбранных для постановки реакции. В первый добавляют равный объем рабочей дозы антигена и титруют согласно вышеописанной схеме. Учет реакции проводят после оседания эритроцитов в контроле. При правильном определении рабочей дозы в первой, второй лунках должна быть полная агглютинация (), в третьей частичная, в четвертой — отсутствие агглютинации (). Полная агглютинация в третьей лунке означает, что доза антигена завышена, а отсутствие агглютинации в первой или во второй лунках — свидетельствуют о недостаточном его количестве. Корректирование рабочей дозы (увеличение или уменьшение) проводят путем добавления антигена или забуференного физиологического раствора с обязательным повторным контролем 4 ГАЕ. Постановка РТГА — Для постановки реакции во все лунки полистироловой планшеты вносят забуференный физиологический раствор в объеме 0,05 (0,025) мл. Затем в первую лунку добавляют равный объем испытуемой сыворотки, трижды пипетируют и готовят ряд последовательных двукратных разведении (с 1 : 2 до 1 : 4096). После этого, во все лунки вносят рабочее разведение антигена в объеме 0,05 (0,025) мл, осторожно встряхивают и после 20 — 30 минут контакта сыворотки с антигеном в каждую лунку добавляют двойной объем (по отношению к объему забуференного физиологического раствора) суспензии эритроцитов. Контроли: сыворотки на изоагглютинацию (сыворотка + забуференный физиологический раствор в равных объемах + 0,7 % суспензия эритроцитов в двойном объеме). Агглютинация должна отсутствовать; эритроцитов на спонтанную агглютинацию (суспензия эритроцитов + забуференный физиологический раствор в равных объемах). Агглютинация должна отсутствовать; положительной специфической сыворотки (положительного контроля). Титр контрольной положительной сыворотки указан на флаконе + одно разведение. Реакцию учитывают через 25 — 40 минут. При наличии в сыворотке антител наблюдают торможение гемагглютинации — эритроциты выпадают в осадок в виде . Титром сыворотки — считают наибольшее ее разведение, дающее полное торможение гемагглютинации рабочей дозы антигена НБ. Интерпретация полученных результатов: По результатам РТГА определяют эффективность иммунизации в партии привитых цыплят путем деления суммарного количества проб с титром антител 1 : 8 и выше (после применения живых вакцин) или 1 : 16 (после применения инактивированных вакцин) на общее число исследованных сывороток и выражают в процентах. Птицу считают невосприимчивой к НБ при эффективности иммунизации 80 и более процентов после применения живых вирусвакцин и 90 и более процент
ов после использования инактивированных препаратов. При эффективности иммунизации менее 80 % после применения живых вирусвакцин и менее 90 % после применения инактивированных вирусвакцин птица подлежит повторной вакцинации. Обнаружение в РТГА высокого титра антител (1 : 2048 и выше у птиц, привитых живыми вакцинами, и 1 : 4096 и выше у птиц, привитых инактивированными вакцинами) свидетельствует о возможной циркуляции в стаде полевого вируса ньюкаслской болезни. В таких случаях через 21 — 30 суток проводят повторное исследование проб сывороток крови, полученных от этих же птиц. Снижение или стабилизация уровня антител и (или) уменьшение количества птиц с высоким уровнем антител при повторных исследованиях проб сыворотки крови свидетельствует об отсутствии циркуляции в хозяйстве эпизоотического вируса и является следствием поствакцинальных реакций. Нарастание титров и (или) увеличение количества птиц с высоким уровнем антител при отсутствии клинических и патологоанатомических признаков НБ не является основанием для объявления хозяйства неблагополучным по данному заболеванию, но предусматривает установление за птицей тщательного наблюдения, проведения систематических серологических и вирусологических исследовании. Нарастание титров и (или) увеличение количества птиц с высоким уровнем антител при наличии клинико-патологоанатомических признаков заболевания служит основанием для проведения детального эпизоотологического обследования хозяйства и установления окончательного диагноза по данному заболеванию. Обнаружение антител к вирусу ньюкаслской болезни у птиц, не привитых против НБ без клинических и патологоанатомических признаков заболевания свидетельствует о циркуляции полевых лентогенных штаммов вируса ньюкаслской болезни и не является основанием для объявления хозяйства неблагополучным по НБ. За птицей таких хозяйств устанавливают постоянное наблюдение.Особые указанияНе предусмотрены.Условия храненияВ сухом темном месте при температуре от 2 до 8 °С. Срок годности — 12 месяцев.ПроизводительФедеральный центр охраны здоровья животных ФГУ (ВНИИЗЖ ФГУ), Россия
Адрес: 600901, г. Владимир, мкр. Юрьевец.
Тел.: (4922) 26-06-14
Тел./факс: (4922) 26-38-77
E-mail: mail@arriah.ru
Подробнее о производителе
ПродавецМесто Вашей рекламы
По вопросам размещения информации
о ветеринарных препаратах и кормовых добавках
в Электронном справочнике «Ветеринарные препараты в России»
и заключения договоров на публикацию
обращайтесь в ООО «Ветторг» по электронной почте: vettorg@mail.ru
Источник