Наследственных болезней обмена веществ мгнц рамн

       По всем вопросам связанных с диагностикой обращайтесь в МЕДИКО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ НАУЧНЫЙ ЦЕНТР РАМН по адресу 115478, Москва, Москворечье ул., д. 1
тел: +74993248772 (регистратура), +74993242004 (лаборатория наследственных болезней обмена веществ) Этот адрес электронной почты защищён от спам-ботов. У вас должен быть включен JavaScript для просмотра.

Общие принципы лабораторной диагностики наследственных болезней обмена веществ

  На клиническом уровне диагноз НБО может быть только заподозрен, и  дальнейшая диагностика целиком зависит от применения необычайно широкого спектра биохимических и молекулярно-генетических методов. В большинстве случаев только  сочетанная интерпретация всех полученных результатов дает возможность точно определить форму заболевания.

Стратегия  достоверной диагностики  НБО  включает несколько этапов: 1. Выявление  дефектного звена метаболического пути   посредством анализа (количественного, полуколичественного или качественного) соответствующих метаболитов; 2. Выявление дисфункции белка посредством оценки его количества и/или активности; 3. Выяснение природы мутации, т.е. характеристика мутантного аллеля на уровне гена.

Такая стратегия  используется не только для решения научных проблем, касающихся изучения нормального метаболизма, молекулярных механизмов патогенеза НБО, выявления гено-фенотипических корреляций, она необходима прежде всего для практической диагностики НБО. Верифицировать диагноз на уровне белка и мутантного гена необходимо как для проведения пренатальной диагностики, медико-генетического консультирования отягощенных семей, так и в ряде случаев для назначения адекватной терапии. Например, при недостаточности дигидроптеридинредуктазы клинический фенотип и уровни фенилаланина будут неотличимы от классической формы ФКУ, но подходы к терапии этих заболеваний принципиально отличаются. Важность локусной дифференциации НБО для медико-генетического консультирования может быть продемонстрирована на примере  мукополисахаридоза II типа (болезнь Хантера). По спектру экскретируемых гликозаминогликанов невозможно дифференцировать между собой  мукополисахаридозы II, I и VII типов, но  из этих заболеваний только болезнь Хантера наследуется по Х-сцепленному рецессивному типу, что имеет принципиальное значение для прогноза потомства в отягощенной семье. Безусловна приоритетность  молекулярно-генетических методов при установлении гетерозиготного носительства, а также  в пренатальной диагностике заболеваний, при которых мутантный фермент не экспрессируется в клетках ворсин хориона. 

Этап исследования метаболитов

Оценка метаболитов в биологических жидкостях — необходимый этап диагностики аминоацидопатий, органических ацидурий, мукополисахаридозов, митохондриальных и пероксисомных болезней, дефектов метаболизма пуринов и пиримидинов и т.д. Хроматографические методы анализа играют важнейшую роль в диагностике НБО. Это обусловлено тем, что современный арсенал хроматографических технологий чрезвычайно широк и позволяет эффективно и информативно разделять сложные многокомпонентные смеси, к которым в том числе относится и биологический материал. Для селективного скрининга НБО успешно используется тонкослойная хроматография, позволяющая получать информацию на качественном уровне. Этот метод хроматографии применим для разделения аминокислот, пуринов и пиримидинов, углеводов, олигосахаридов. Для количественного анализа маркеров-метаболитов НБО успешно применяются такие хроматографические методы как газовая и высокоэффективная жидкостная хроматографии, а также хроматомасс-спектрометрия (ГХ, ВЭЖХ и ХМС соответственно). ГХ и ВЭЖХ являются универсальными методами разделения сложных смесей соединений, отличаются высокой чувствительностью и воспроизводимостью. В обоих случаях разделение осуществляется в результате различного взаимодействия компонентов смеси с неподвижной и подвижной фазами  хроматографической колонки. Для ГХ подвижной фазой является газ-носитель, для ВЭЖХ —  жидкость (элюент). Выход каждого соединения фиксируется детектором прибора, сигнал которого преобразуется в пики на хроматограмме. Каждый пик характеризуется временем удерживания и площадью. Следует отметить, что ГХ проводится, как правило, при высокотемпературном режиме, поэтому ограничением для ее применения является термическая неустойчивость соединений. Для ВЭЖХ не существует подобных ограничений, т.к. в этом случае анализ проводится в мягких условиях. ХМС представляет собой комбинированную систему ГХ или ВЭЖХ с масс-селективным детектором, что позволяет получать не только количественную, но и качественную информацию, т.е. дополнительно определяется структура соединений в анализируемой смеси.

Одним из перспективных направлений в развитии программ диагностики НБО является  применение методов, позволяющих количественно  определять множество метаболитов, являющихся маркерами разных групп НБО.  К таким методам относится тандемная  масс-спектрометрия (ТМС). ТМС позволяет охарактеризовать структуру, молекулярную массу и провести количественную оценку 3000 соединений одновременно. При этом  не требуется длительной подготовки проб для проведения анализа (как, например, для   ГХ), а время исследования занимает несколько секунд.

Этап исследования мутантных белков

Исследование мутантных белков может проводиться с помощью различных методов:

1. Определение активности фермента с применением естественных субстратов;
2. Определение активности фермента с использованием искусственных субстратов;
3. Нагрузка культивируемых фибробластов накапливаемыми субстратами;
4. Измерение концентрации белка с помощью иммунохимических методов.

Материалом для измерения активности ферментов при НБО  являются прежде всего лейкоциты периферической крови: практически при всех лизосомных болезнях накопления, метилмалоновой ацидурии, некоторых гликогенозах. Для диагностики GM2-ганглиозидозов, недостаточности биотинидазы  используют плазму или сыворотку крови. В некоторых случаях объектами исследования являются  мышечная или печеночная ткань: ферменты дыхательной цепи митохондрий, гликогенозы. Также широко используется для диагностики культура кожных фибробластов.

Этап исследования мутантных  генов

Развитие методов молекулярной биологии явилось настоящей революцией в области клинической биохимии. Разработка стандартных протоколов молекулярных исследований и автоматизация используемых методов являются сегодня законченным комплексом диагностических подходов и становятся наряду с биохимическими методами рутинной процедурой в клинических лабораториях. Быстрое развитие исследований в области расшифровки генома человека и определение ДНК- последовательности генов делает сейчас возможным ДНК-диагностику различных наследственных заболеваний. Методы ДНК-диагностики и анализа структуры нормальных генов и их мутантных аналогов при наследственных болезнях обмена начали использоваться в течение последнего десятилетия.

Для ДНК-диагностики наследственных заболеваний используются два основных подхода — прямая и косвенная ДНК-диагностика. Прямая ДНК-диагностика представляет собой исследование первичной структуры поврежденного гена и выделение мутаций, ведущих к заболеванию. Для детекции молекулярных повреждений в генах, обуславливающих наследственные  болезни, используется стандартный арсенал методов молекулярной биологии. В зависимости от характеристики и типов мутаций, частот их встречаемости при различных наследственных заболеваниях, те или иные методы являются наиболее предпочтительными.

 Для диагностики НБО  в тех случаях, когда биохимический дефект точно известен,  легко и достоверно определяем с использованием биохимических методик,  ДНК-методы вряд ли займут приоритетное место. В этих случаях применение ДНК-анализа является скорее научно-исследовательским, а не диагностическим подходом. Однако после точно установленного диагноза методы ДНК-анализа будут полезны для последующей пренатальной диагностики, идентификации гетерозиготных носителей в семье и прогноза заболевания у гомозигот, а также для отбора больных с целью проведения казуальной терапии в будущем (фермент-заместительной и генотерапии). Также в случаях, когда биохимический дефект точно не известен, биохимическая диагностика затруднена, недостаточно достоверна или требует инвазивных методов исследования, методы ДНК-диагностики являются единственными и незаменимыми для точной постановки диагноза.

В общем виде тактика проведения диагностики НБО в каждом конкретном случае должна планироваться совместно с врачом-биохимиком и врачом-генетиком. Необходимыми условиями успешной и быстрой диагностики является понимание этиологии, механизмов патогенеза заболевания, знание специфических биохимических маркеров.

Обследование наследственных болезней обмена веществ в МГНЦ РАМН,и обследование в лаборатории молекулярной патологии «Геномед».Мамочки из Москвы и не только,кто проходил обследования в этих лабораториях,напишите пож-та отзывы,нас направляют на об Обсуждаем медицинские и реабилитационные учреждения, которые работают с детьми аутичного поведения Медицинские и реабилитационные учреждения для аутистов Форум родителей детей с аутизмом

Логин:   Пароль: Обычный Безопасный Запомнить пользователя Зарегистрироваться Забыли пароль?

Форум ребёнок-инвалид »   Форум родителей детей с аутизмом »   Медицинские и реабилитационные учреждения для аутистов »   Обследование наследственных болезней в Москве Обследование наследственных болезней в Москве Обследование наследственных болезней обмена веществ в МГНЦ РАМН,и обследование в лаборатории молекулярной патологии «Геномед».Мамочки из Москвы и не только,кто проходил обследования в этих лабораториях,напишите пож-та отзывы,нас направляют на об <<Назад  Вперед>> Печать Зарина Долгожитель форума Откуда: ХМАО Всего сообщений: 452 Рейтинг пользователя: Дата регистрации на форуме: 13 окт. 2012 Профиль | Игнорировать NEW! Сообщение отправлено: 11 сентября 2014 16:07 Вот не день, а «праздник». Только из фильмов ужасов. Я тут, окрыленная собралась беременеть, сдала кровь, мазок на вирусы и инфекции, пью витамины уже месяц, записалась на узи и вот … сегодня в очередной раз генетик нажал на тормоз, при чем конкретно. Направляет нас на обследование в Москву, за свой счет, т.е. советует, но очень настойчиво ехать и сдавать анализы именно в этих лабораториях. Она говорит, что может найдут мутацию(которая одна на миллион, тогда можно беременеть). Она уверенна, что у нас генетика. Хотя это же 3 этап нашего обследования, все основные и бесплатные анализы сданы, все чисто. Кроме Целиакии, и там основной гаплотип отсутствует, выявлен 1 рисковый аллель, благодаря ему может развиваться целиакия. Мамочки как Вы считаете нужно нам ехать на обследования? Может кто уже обследовался в данных лабораториях, напишите свой отзыв пож-та. Наверх Ижевод Администратор Всего сообщений: 1345 Рейтинг пользователя: Дата регистрации на форуме: 12 июля 2008 Профиль | Игнорировать NEW! Сообщение отправлено: 11 сентября 2014 21:06 Мне кажется что всё зависит от того, насколько сложно ехать в Москву, и на сколько обременительна для Вас оплата анализов. Если это не сложно то можно съездить, потому что лишняя информация не помешает, а в Москве уровень лаборатории выше чем на периферии. Но если это очень обременительно, то может быть и не стоит ехать, тем более что бывает так, что генетика не может дать однозначного ответа. Наверх Зарина Долгожитель форума Откуда: ХМАО Всего сообщений: 452 Рейтинг пользователя: Дата регистрации на форуме: 13 окт. 2012 Профиль | Игнорировать NEW! Сообщение отправлено: 12 сентября 2014 10:46 Ижевод поездка в Москву для нас это своего рода совершить подвиг, но мы к нему готовы. По поводы оплаты, генетик уверяет, что стоимость наших обследований не превысит 25-30 тыс. Мы уже 3 год обследуемся, это своего рода дообследование. Генетик утверждает, что может обнаружиться случайная мутация, которая одна на миллион. Или наоборот, где вероятность рождение второго 25%, тогда уже все. В «Геномед»е нам советует сделать молекулярное кариотипирование arrayCGH. В прейскуранте не нашла цены, генетик говорит что в 2013 году анализ стоил 30 тыс., в этом году 15, снижение цены объясняется, что используются все пробирки(объясняя своими словами), т.е. сейчас больше сдают на этот анализ. А в МГНЦ РАМН наследственных болезней обмена веществ :тандем-масс спектометрия, гразовая хромотография, альфа-D-манназидоз. Наверх Ершистик Долгожитель форума Откуда: Московская область Всего сообщений: 2222 Рейтинг пользователя: Дата регистрации на форуме: 5 мая 2011 Профиль | Игнорировать NEW! Сообщение отправлено: 12 сентября 2014 11:16 Сообщение отредактировано: 12 сентября 2014 11:25 Зарина, найдете — не найдете, это еще вопрос… вот Милане ничего не нашли, хотя они с мужем исследовались вдоль и поперек… https://invamama.ru/story/359/ вам нужно для себя решить очень важную вещь… если обнаружите, то что?.. если ничего не найдут, то что?… вариантов масса… и вы должны обсудить это с мужем… (не иметь детей вообще, беременеть — проверяться — если что прерывать, беременеть — и рожать по-любому). Это очень серьезные вопросы. И решают их все по-разному. То есть вам это исследование зачем? Генетику — понятно зачем: работа такая, интересно, статистика, новый случай… а вам, вам лично это нужно? Что вы будете делать с результатом? Повлияет ли этот результат на вашу дальнейшую жизнь и жизнь ваших детей?.. и как именно?.. Наверх Зарина Долгожитель форума Откуда: ХМАО Всего сообщений: 452 Рейтинг пользователя: Дата регистрации на форуме: 13 окт. 2012 Профиль | Игнорировать NEW! Сообщение отправлено: 12 сентября 2014 17:41 Ершистик мне нужен здоровый малыш. Психика моя слабая. Я,конечно преклоняюсь перед Миланой и Лаской, но не уверенна что способна еще раз пережить инвалидность ребенка. Если не найдут, или найдут редкую-буду берменеть. Надеюсь еще на мать-природу и молодой организм, который подскажет если что. С сыном беременность была очень тяжелая, хотя предварительно тоже проверялась. Муж пока однозначного ответа не дает по поводу Москвы, в октябре планиую его сводить к генетику, чтоб он уже решил поедим мы или нет. Он без отпуска 2 года, не в восторге, но и нет не говорит. Наверх Зарина Долгожитель форума Откуда: ХМАО Всего сообщений: 452 Рейтинг пользователя: Дата регистрации на форуме: 13 окт. 2012 Профиль | Игнорировать NEW! Сообщение отправлено: 12 сентября 2014 17:47 Единственное я бы на эти деньги поехала лучше в Питер, микрополяризацию попробовать и дельфинов. Жаль, что мы не состоятельная семья, а то можно было бы и то, и то попробовать. Наверх ЖЕНЮША Долгожитель форума Откуда: САНКТ-ПЕТЕРБУРГ Всего сообщений: 656 Рейтинг пользователя: Дата регистрации на форуме: 12 авг. 2014 Профиль | Игнорировать NEW! Сообщение отправлено: 13 сентября 2014 8:39 ЗаринаГенетические анализы дорогие. Мы хоть и живем в Питере но наши анализы возили в Москву мы оплачивали через сберкассу доставку до лаборатории. У нас в Питере только кариотип делали. На анализы отправили когда уже было подозрение на конкретную болезнь. При 2 беременности риск больного ребенка был 25% но пронесло. Когда ходили с малой только носительство мутации. Но я паникерша спросила про другие ген болезни(у генетика перед беременностью) на что мне ответили риск спонтанных мутации присутствуют в каждой беременности. Поэтому беременная я не проверяла будет ли у будущего ребенка как у старшего Вильсона-Коновалова или нет. Ведь может быть помимо генетики всякая фигня не знаешь от чего беречся. У малой сильная травма шоп при кесареве была до 10 мес ставили угрозу дцп проскочили еле-еле. Как эта травма скажется дальше ни кто не говорит(я надеюсь никак). А вам от всей души желаю счасливой беременности и легких родов и здорового малыша если решитесь Наверх аут-мама Самый активный участник голосования Откуда: Сыктывкар Всего сообщений: 5673 Рейтинг пользователя: Дата регистрации на форуме: 15 фев. 2010 Профиль | Игнорировать NEW! Сообщение отправлено: 13 сентября 2014 11:24 Зарина может, вначале попробовать связаться со специалистами этих клиник, куда ехать думаете? Может, есть варианты сдать нужные анализы и переправить в Мск? По сути, выяснить-то надо, была ли именно спонтанная мутация или этот ген есть у родителей и уже далее вы для себя решаете, как Юля выше писала. Со спонтанной — тут у всех шансы одинаковые, это каждый раз может возникнуть (да и возникают, просто не все же мутации проявляются и не все можно определить по проявлениям). Наверх Зарина Долгожитель форума Откуда: ХМАО Всего сообщений: 452 Рейтинг пользователя: Дата регистрации на форуме: 13 окт. 2012 Профиль | Игнорировать NEW! Сообщение отправлено: 13 сентября 2014 11:43 аут-маматак тоже можно, не выезжая из города оформить и направить их в Москву. Но генетик утверждает, что это несерьезно, что могут запросто перепутать анализы. Наверх аут-мама Самый активный участник голосования Откуда: Сыктывкар Всего сообщений: 5673 Рейтинг пользователя: Дата регистрации на форуме: 15 фев. 2010 Профиль | Игнорировать NEW! Сообщение отправлено: 13 сентября 2014 11:48 Зарина пишет: [q] аут-маматак тоже можно, не выезжая из города оформить и направить их в Москву. Но генетик утверждает, что это несерьезно, что могут запросто перепутать анализы. [/q] Зарина, а он даст гарантию, что анализы не могут перепутать, взяв их у вас там? Это уже от порядка в клинике зависит. Они же не пустят вас в лабораторию стоять и смотреть, как они делают это. В общем, генетик меня немало повеселил Может стоит созвониться/списаться с клиниками и выяснить? Озвучив и опасение, что заочно ваш анализ перепутают вдруг ? Наверх МамаРиты Долгожитель форума Откуда: Россия Всего сообщений: 278 Рейтинг пользователя: Дата регистрации на форуме: 5 нояб. 2012 Профиль | Игнорировать NEW! Сообщение отправлено: 14 сентября 2014 15:12 Зарина, интересная тема. Очень сложная. Тоже задумывалась над этим и не раз. Мы с мужем хотим второго ребенка. У первого генетическая мутация с частотой 1:160 000 родов. После такого попадания «В яблочко» мне сложно думать, что, к примеру, рождение ребенка с каким либо синдромом с вероятностью 0, 007% пройдет мимо меня… Кому-то покажется мизерна эта вероятность, но не мне. Потому считаю, что Ершистик права, главное решить «если да, то что тогда?» Я тоже ходила к генетику, и она мне сказала, что никто и никогда, никакие анализы не покажут 100% гарантию рождения здорового ребенка. Меня сейчас часто посещают мысли, что не вынесу при беременности вот этого ожидания, наконец, родов и вердикта врачей — здоров или нет. Просто сумасшествие какое-то. Наверх Зарина Долгожитель форума Откуда: ХМАО Всего сообщений: 452 Рейтинг пользователя: Дата регистрации на форуме: 13 окт. 2012 Профиль | Игнорировать NEW! Сообщение отправлено: 14 сентября 2014 17:21 МамаРитыКатерина у меня точно такое же ощущение))) Прямо точь-в-точь. Но как представлю малыша пухленького розощекого… все равно ХОЧУ… Мне и гадалка сказала, что раньше и генетиков не было и ни че… Вот только воспалительных процессов много, нужно подлечиться, ну и этот анализ сдать. Интуиция моя говорит, надо, все нормально будет, а как вспомню беременность свою невыносимую, то чет начинаю очковать. И я так боролась за сына, молилась со слезами, что ве-таки выносила. А вот у моих знакомых с тяжелой беременностью выкидыши. И вторые дети здоровые. Поэтому на бога не злюсь))). И не знаю смогла бы я пережить выкидыш. Это было бы в 100 раз тяжелее чем диагноз РДА. И как бы там не было, я его обожаю, и вот на сегодняшний день думаю, что все равно сохранила бы беременность. Но испытание такое пережить чет не хочется. У нас еще индив. диета, с едой очень замарачиваюсь, мужу отдельно, сыну. Изо дня в день все равно напрягает. А у них у обоих смысл жизни-ЕДА))). Но и сын несмотря на непереносимость молока, сахара, глютена хочется чтоб он жил как все. Вот и приходится творить. МамаРитыКатерина а что у Вас с первым? Наверх МамаРиты Долгожитель форума Откуда: Россия Всего сообщений: 278 Рейтинг пользователя: Дата регистрации на форуме: 5 нояб. 2012 Профиль | Игнорировать NEW! Сообщение отправлено: 14 сентября 2014 20:40 У моей дочки нет пальцев на руках и ногах. То есть не совсем нет, а 6 вместо 20-ти. Я насколько поняла, диагноз РДА не ставится раньше трех лет(примерно), то есть узнать во время беременности это невозможно. А вот массу других пороков можно выявить, но как-то не получается у наших врачей. То ли желания нет, то ли мозгов. А может эти вещи взаимосвязаны)))) Я, конечно, тоже своего ребенка очень люблю. Но повторения такого не хочу допускать. Опять же, это моё мнение пока я не беременна, а как я подумаю будучи в положении, не знаю точно. Да и, безусловно, такое решение принимать буду не одна. Наверх аут-мама Самый активный участник голосования Откуда: Сыктывкар Всего сообщений: 5673 Рейтинг пользователя: Дата регистрации на форуме: 15 фев. 2010 Профиль | Игнорировать NEW! Сообщение отправлено: 15 сентября 2014 9:30 МамаРитыКатерина пишет: [q] У первого генетическая мутация с частотой 1:160 000 родов. [/q] ну это как с метеоритом или кирпичом на голову Нет, в самом деле — тут чисто воля случая и стихий. Но, что погано, согласно — вытянутое «не то» не убирает опять же этот неприятный шанс из расклада дальше… Вот в случае носительства мутации родителями это хуже, тут не произойдёт-не произойдёт сбой новый (все мы под Богом или кем ещё ходим ), а как в рулетке русской с заряжеными носительством или «пустыми» патронами — 1 из 4, к примеру, или 1 из 2 шансов. Так что нервиничание ваше ооооочень понятно! Наверх Зарина Долгожитель форума Откуда: ХМАО Всего сообщений: 452 Рейтинг пользователя: Дата регистрации на форуме: 13 окт. 2012 Профиль | Игнорировать NEW! Сообщение отправлено: 15 сентября 2014 15:42 МамаРитыКатеринада РДА ставится в 3 года, но как говорят врачи беременность не должна быть болезнью, а так и было. Если бы были «теперешние»мозги, может и выплыли бы из тяжелой неврологии. А так все было плохо, а мы до 2 лет не лечили, думали рассосется. А в вашем случае, если нашли мутацию, ее можно выявить(не дай бог) в следующей беременности. Не знаю, если возраст еще позволяет подождать, подумать взвесив все за и против. Наверх <<Назад  Вперед>> Печать Форум ребёнок-инвалид »   Форум родителей детей с аутизмом »   Медицинские и реабилитационные учреждения для аутистов »   Обследование наследственных болезней в Москве

IntB Green2 Style © Fisana