Вирусвакцина сухая культуральная против болезни ауески
???? Инструкция по применению ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ БОЛЕЗНИ АУЕСКИ СВИНЕЙ И ОВЕЦ СУХАЯ КУЛЬТУРАЛЬНАЯ ИЗ МАРКИРОВАННОГО ШТАММА «ВК»
???? Состав препарата ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ БОЛЕЗНИ АУЕСКИ СВИНЕЙ И ОВЕЦ СУХАЯ КУЛЬТУРАЛЬНАЯ ИЗ МАРКИРОВАННОГО ШТАММА «ВК»
✅ Применение препарата ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ БОЛЕЗНИ АУЕСКИ СВИНЕЙ И ОВЕЦ СУХАЯ КУЛЬТУРАЛЬНАЯ ИЗ МАРКИРОВАННОГО ШТАММА «ВК»
???? Условия хранения ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ БОЛЕЗНИ АУЕСКИ СВИНЕЙ И ОВЕЦ СУХАЯ КУЛЬТУРАЛЬНАЯ ИЗ МАРКИРОВАННОГО ШТАММА «ВК»
⏳ Срок годности ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ БОЛЕЗНИ АУЕСКИ СВИНЕЙ И ОВЕЦ СУХАЯ КУЛЬТУРАЛЬНАЯ ИЗ МАРКИРОВАННОГО ШТАММА «ВК»
Описание лекарственного препарата ветеринарного назначения ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ БОЛЕЗНИ АУЕСКИ СВИНЕЙ И ОВЕЦ СУХАЯ КУЛЬТУРАЛЬНАЯ ИЗ МАРКИРОВАННОГО ШТАММА «ВК»
основано на официально утвержденной инструкции по применению
препарата ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ БОЛЕЗНИ АУЕСКИ СВИНЕЙ И ОВЕЦ СУХАЯ КУЛЬТУРАЛЬНАЯ ИЗ МАРКИРОВАННОГО ШТАММА «ВК» для специалистов
и утверждено компанией-производителем для издания справочника Видаль Ветеринар
2013 года
Лекарственная форма
ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ БОЛЕЗНИ АУЕСКИ СВИНЕЙ И ОВЕЦ СУХАЯ КУЛЬТУРАЛЬНАЯ ИЗ МАРКИРОВАННОГО ШТАММА «ВК» | Лиофилизированная масса рег. №: ПВР-1-2.7/01983 |
Форма выпуска, состав и упаковка
Лиофилизированная масса светло-коричневого цвета, сухая, однородная, пористая, легко растворимая в дистиллированной воде или растворе натрия хлорида изотоническом 0.9% (физиологический раствор) без образования хлопьев и осадка.
1 доза | |
вирус болезни Ауески штамм «ВК»* | не менее 6.0 lg ТЦД50 |
* из маркированного — gE негативного штамма «ВК» вируса болезни Ауески, выращенного на перевиваемой культуре клеток.
Вспомогательные вещества: стабилизатор 20% гидролизата лактальбумина (62.5%), 50% сахарозы (25%) и 10% желатозы (12.5%).
Расфасована по 100 прививных доз (4 см3) во флаконы соответствующей вместимости, герметично укупоренные резиновыми пробками, укрепленными алюминиевыми колпачками. Лиофилизирована под вакуумом. Флаконы или ампулы с вакциной упакованы в блистеры, коробки или пачки. Каждый блистер/коробка/пачка с вакциной снабжены инструкцией по применению. Блистеры/коробки/пачки с вакциной упакованы в ящики из гофрокартона (транспортная тара).
Фармакологические (биологические) свойства и эффекты
Вирусвакцина против болезни Ауески свиней и овец.
Механизм действия вакцины заключается в индукции выработки в организме вакцинированных животных активного иммунитета к болезни Ауески.
Иммунитет формируется через 7 сут после применения препарата. Длительность иммунитета у двукратно привитых животных сохраняется не менее 12 мес.
Вирусвакцина безвредна и ареактогенна.
Показания к применению препарата ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ БОЛЕЗНИ АУЕСКИ СВИНЕЙ И ОВЕЦ СУХАЯ КУЛЬТУРАЛЬНАЯ ИЗ МАРКИРОВАННОГО ШТАММА ВК
— для профилактической иммунизации свиней и овец в неблагополучных и угрожаемых по болезни Ауески хозяйствах (фермах).
Порядок применения
Предварительно все поголовье подвергают клиническому осмотру. Вакцинации подлежат только клинически здоровые животные.
Перед применением сухую вирусвакцину растворяют охлажденным при температуре от 2°С до 8°С стерильным физиологическим раствором или дистиллированной водой. В ампулу с вакциной осторожно, соблюдая правила асептики, шприцем вносят 2 см3, а во флакон — 4 см3 физиологического раствора, прокалывая иглой пробку. После растворения содержимое ампулы или флакона переносят в стерильный флакон, содержащий соответственно 48 см3 или 96 см3 стерильного физиологического раствора и тщательно перемешивают. Разведенная вакцина должна быть использована в течение 2 ч с момента растворения.
Перед вакцинацией шприцы и иглы стерилизуют кипячением. Место введения вакцины дезинфицируют 70% этиловым спиртом. Вакцину вводят под кожу или внутримышечно в область верхней трети шеи или внутренней поверхности бедра в дозе 1.0 см3.
В неблагополучных и угрожаемых по болезни Ауески хозяйствах животных прививают с 2-суточного возраста двукратно с интервалом 20-25 сут и ревакцинируют однократно через 2 мес после повторной иммунизации. Поросятам в 2-15 — суточном возрасте при первой иммунизации вакцину вводят подкожно в области внутренней стороны бедра, а второй — внутримышечно в дозе 1.0 см3. Поросятам старше 20-суточного возраста вирусвакцину вводят внутримышечно в дозе 1.0 см3.
Супоросных свиноматок в угрожаемых и неблагополучных хозяйствах по болезни Ауески вакцинируют не позднее, чем за месяц до опороса.
Поросят, полученных от вакцинированных свиноматок, прививают дважды: первый раз в 45-60-суточном возрасте, повторно — через 2-3 недели, в дозе 1.0 см3.
Взрослых свиней и подсвинков, в неблагополучных и угрожаемых по болезни Ауески хозяйствах после двукратной их вакцинации, ревакцинируют через 12 мес однократно удвоенной дозой.
Овец с профилактической целью в неблагополучных хозяйствах вакцинируют, начиная с 6-месячного возраста, двукратно с интервалом между инъекциями 20-25 сут, подкожно в области внутренней стороны бедра в дозе 1.0 см3 на каждую инъекцию.
Иммунитет у животных после первой вакцинации формируется через 5-7 сут. У двукратно привитых животных продолжительность иммунитета составляет 12 мес, за исключением поросят-сосунов, которых подвергают ревакцинации, как указано выше.
После окончания вакцинации составляют акт с указанием даты, эпизоотического состояния хозяйства перед вакцинацией, количества иммунизированных животных с учетом возраста, номера серии, контроля, срока годности, где изготовлена вакцина, фамилии лица, проводившего вакцинацию.
Побочные эффекты
За привитыми животными в течение 15 сут ведут наблюдение. При этом у отдельных поросят может отмечаться в течение 2-3 сут повышение температуры тела на 1.0-1.5°С без изменения общего состояния.
Противопоказания к применению препарата ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ БОЛЕЗНИ АУЕСКИ СВИНЕЙ И ОВЕЦ СУХАЯ КУЛЬТУРАЛЬНАЯ ИЗ МАРКИРОВАННОГО ШТАММА ВК
Не имеются.
Особые указания и меры личной профилактики
Сроки убоя вакцинированных животных на мясо не ограничены. Молоко от вакцинированных овец используют без ограничений.
Перегруппировки вакцинированных животных и передача их в другие хозяйства разрешается не ранее, чем через 10 сут после вакцинации.
Меры личной профилактики
На рабочем месте запрещается принимать пищу, пить и курить. После работы принять душ, тщательно вымыть руки с мылом, переодеться. В местах работы должна быть аптечка первой доврачебной помощи.
Условия хранения ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ БОЛЕЗНИ АУЕСКИ СВИНЕЙ И ОВЕЦ СУХАЯ КУЛЬТУРАЛЬНАЯ ИЗ МАРКИРОВАННОГО ШТАММА «ВК»
Вирусвакцину следует хранить при температуре от 2° до 8°С в сухом темном месте.
Вирусвакцину следует хранить в недоступных для детей местах.
Вирусвакцину в ампулах или флаконах без этикеток, с нарушением целостности, изменением цвета и консистенции, а также, не использованную в течение 2 ч после растворения, обеззараживают путем кипячения в течение 30 мин.
Срок годности ВИРУСВАКЦИНА ПРОТИВ БОЛЕЗНИ АУЕСКИ СВИНЕЙ И ОВЕЦ СУХАЯ КУЛЬТУРАЛЬНАЯ ИЗ МАРКИРОВАННОГО ШТАММА «ВК»
Срок годности -18 месяцев с даты изготовления. Вирусвакцина по окончании срока годности не должна применяться.
Источник
Описание лекарственного препарата: ВИРУСВАКЦИНА «ВГНКИ» СУХАЯ КУЛЬТУРАЛЬНАЯ ПРОТИВ БОЛЕЗНИ АУЕСКИ / NNN
Описание препарата основано на официально утвержденной инструкции по применению и утверждено компанией-производителем для издания 2004 г.
Представленная информация предназначена для врачей и работников здравоохранения. Издательство не несет ответственности за возможные отрицательные последствия, возникшие в результате неправильного использования представленной информации. Copyright © Справочник Видаль «Лекарственные препараты в России», Москва, Россия |
Источник
Вирусвакцина «ВГНКИ» сухая культуральная против болезни Ауески
Армавирская биофабрика, Россия
Лекарственная форма:
Лиофилизат для приготовления суспензии для инъекций, живая вакцина. Вакцина изготовлена из аттенуированного вируса болезни Ауески (штамм «ГНКИ»), полученного на культуре клеток фибробластов куриных эмбрионов, с добавлением желатино-сахарозной среды (50%) в качестве стабилизатора.
Характеристика:
Сухая масса беловатого или слегка розоватого оттенка.
Показания к применению:
Применяют для профилактической иммунизации свиней, крупного рогатого скота и овец в неблагополучных и угрожаемых по болезни Ауески хозяйствах (фермах).
Способ применения и дозы:
Вакцинируют животных в сроки и в дозах, указанных в наставлении. Вакцину перед применением разводят стерильным физиологическим раствором. Иммунитет у животных после первой прививки вирусвакциной наступает через 5-7 дней и у двукратно привитых сохраняется 15-16 месяцев.
СХЕМА ВАКЦИНАЦИИ И ОБЪЁМ ВИРУСВАКЦИНЫ В УГРОЖАЕМЫХ ПО БОЛЕЗНИ АУЕСКИ ХОЗЯЙСТВАХ:
Поросята-сосуны (16-30 дн.):
- 1-я вакцинация — 1 см³
- 2-я вакцинация (через 20-25 дней) — 2 см³
- 3-я вакцинация (ревакцинация через 2 мес.) — 2 см³
Поросята-отъёмыши и свиньи старших возрастов (c 20 дн. возраста и старше):
- 1-я вакцинация — 2 см³
- 2-я вакцинация (через 20-25 дней) — 2 см³
- 3-я вакцинация (ревакцинация через 11-12 мес.) — 2 см³
Телята (6-12 мес.):
- 1-я вакцинация — 0,5 см³
- 2-я вакцинация (через 20-25 дней) — 1 см³
КРС старших возрастов (12 и более мес.):
- 1-я вакцинация — 0,5 см³
- 2-я вакцинация (через 20-25 дней) — 2 см³
Ягнята (6-12 мес.):
- 1-я вакцинация — 0,5 см³
- 2-я вакцинация (через 20-25 дней) — 1 см³
Взрослые овцы:
- 1-я вакцинация — 0,5 см³
- 2-я вакцинация (через 20-25 дней) — 2 см³
СХЕМА ВАКЦИНАЦИИ И ОБЪЁМ ВИРУСВАКЦИНЫ В НЕБЛАГОПОЛУЧНЫХ ПО БОЛЕЗНИ АУЕСКИ ХОЗЯЙСТВАХ:
Поросята-сосуны (2-15 дн.):
- 1-я вакцинация — 0,5 см³
- 2-я вакцинация (через 20-25 дней) — 1 см³
- 3-я вакцинация (ревакцинация через 2 мес.) — 2 см³
Поросята-сосуны (16-30 дн.):
- 1-я вакцинация — 1 см³
- 2-я вакцинация (через 20-25 дней) — 2 см³
- 3-я вакцинация (ревакцинация через 2 мес.) — 2 см³
Поросята-отъёмыши и свиньи старших возрастов (c 20 дн. возраста и старше):
- 1-я вакцинация — 2 см³
- 2-я вакцинация (через 20-25 дней) — 2 см³
- 3-я вакцинация (ревакцинация через 11-12 мес.) — 2 см³
Телята (6-12 мес.):
- 1-я вакцинация — 0,5 см³
- 2-я вакцинация (через 20-25 дней) — 1 см³
КРС старших возрастов (12 и более мес.):
- 1-я вакцинация — 0,5 см³
- 2-я вакцинация (через 20-25 дней) — 2 см³
Ягнята (6-12 мес.):
- 1-я вакцинация — 0,5 см³
- 2-я вакцинация (через 20-25 дней) — 1 см³
Взрослые овцы:
- 1-я вакцинация — 0,5 см³
- 2-я вакцинация (через 20-25 дней) — 2 см³
В хозяйстве, где выявлено заболевание болезнью Ауески крупного рогатого скота, вакцинируют только КРС.
При выявлении в хозяйстве болезни Ауески овец, вакцинируют только овец.
Телят и ягнят в возрасте до 6 месяцев, в неблагополучных хозяйствах, не вакцинируют.
Поросятам до 20-ти дневного возраста вакцину вводят подкожно, старше — внутримышечно.
Реакция на вакцинацию:
Взрослые животные обычно не реагируют на введение вакцины, а у молодняка в течение 2-3 дней может быть реакция в виде повышения температуры тела на 1-1,5°С без изменения общего состояния.
Форма выпуска:
В стеклянных ампулах или флаконах, содержащих 2 см³ сухой массы (1 см³ исходного вируса в 1 см³ защитной среды) по 12,5; 25 и 125 доз или 4 см³ сухой массы (2 см³ исходного вируса и 2 см³) по 25, 50 и 250 доз в зависимости от титра активности вакцины.
Хранение:
Хранить в тёмном месте при температуре от +2 до +10°С или при постоянной температуре ниже нуля градусов.
Срок годности вакцины при указанных условиях: 18 месяцев со дня изготовления.
Для получения более подробной информации о препарате, позвоните по одному из телефонов:
8 (495) 150-08-74.
Весь перечень и инструкции ветпрепаратов можно посмотреть в каталоге продукции на нашем сайте. В отношении цены, а также о возможности покупки Вас с удовольствием проинформируют наши менеджеры.
Источник
ОКП 93 8462*
______________
* Введено дополнительно, Изм. N 1.
Срок действия с 01.01.79
до 01.01.84*
_______________________________
* Ограничение срока действия снято
по протоколу N 3-93 Межгосударственного Совета
по стандартизации, метрологии и сертификации
(ИУС N 5/6, 1993 год). — Примечание изготовителя базы данных.
РАЗРАБОТАН Министерством сельского хозяйства СССР
Исполнители: Н.В.Лихачев, д-р вет. наук, академик ВАСХНИЛ; А.В.Селиванов, д-р вет. наук, профессор (руководители темы); П.М.Базылев, д-р вет. наук А.М.Силаев, канд. вет. наук; Э.М.Прохорова, канд. биол. наук; Г.А.Голикова, канд. вет. наук
ВНЕСЕН Министерством сельского хозяйства СССР
Член Коллегии А.Д.Третьяков
УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета стандартов Совета Министров СССР от 4 апреля 1978 г. N 938
ВНЕСЕНЫ: Изменение N 1, утвержденное и введенное в действие с 01.01.87 Постановлением Госстандарта СССР от 02.10.86 N 2984, Изменение N 2, утвержденное и введенное в действие с 01.08.90 Постановлением Госстандарта СССР от 13.03.90 N 411
Изменения N 1, 2 внесены изготовителем базы данных по тексту ИУС N 12, 1986 год, ИУС N 6, 1990 год
Настоящий стандарт распространяется на культуральную сухую вирусвакцину ВГНКИ, изготовленную из аттенуированного штамма ГНКИ вируса болезни Ауески, полученного в однослойной культуре клеток куриных эмбрионов и подвергнутого лиофильному высушиванию.
Культуральная сухая вирусвакцина ВГНКИ предназначается для профилактических целей против болезни Ауески свиней, крупного рогатого скота и овец.
1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ
1.1. Культуральная сухая вирусвакцина ВГНКИ должна изготовляться в соответствии с требованиями настоящего стандарта по технологическим правилам, утвержденным в установленном порядке.
1.2. Культуральная сухая вирусвакцина ВГНКИ по своим физическим и иммунобиологическим свойствам должна соответствовать требованиям и нормам, указанным в таблице.
Наименование показателя | Характеристика и норма |
Внешний вид | Пористая сухая масса бело-серого цвета, допускается слегка розоватый оттенок, без плесени и посторонней примеси |
Влажность, % | 1-3 |
Растворимость | Легко растворяется в физиологическом растворе, образуя равномерную взвесь бело-серого цвета |
Стерильность | Посевы на питательные среды не должны давать роста бактериальной микрофлоры и грибов в течение десятисуточного выдерживания в термостате при температуре 37-38 °С и при температуре 20-22 °С |
Активность вакцины по титру инфекционности в культуре клеток куриных эмбрионов, ТЦД, не менее | 10 |
Активность вакцины по титру инфекционности для кроликов, ЛД, не менее | 10 |
Авирулентность | Вакцина должна быть авирулентной для овец в возрасте 1-5 лет. Овцы, привитые вакциной, не должны иметь видимых признаков заболевания и отклонений от физиологической нормы в течение 20 сут наблюдения |
Иммуногенность | Вакцина должна быть иммуногенной для овец в возрасте 1-5 лет. 50%-ная иммунизирующая доза вакцины не должна превышать 5 ЛКД (50%-ная летальная доза для кроликов) |
Наличие вакуума в ампулах | Наличие светло-фиолетового или фиолетово-синего свечения, сопровождающегося характерным потрескиванием при испытании |
(Измененная редакция, Изм. N 1, 2).
1.3. Срок годности культуральной сухой вакцины ВГНКИ — 18 месяцев со дня изготовления.
2. ПРАВИЛА ПРИЕМКИ
2.1. Культуральную сухую вирусвакцину ВГНКИ принимают сериями.
Под серией понимают определенное количество вакцины, одновременно смешанной в одной емкости, фасованной в ампулы или флаконы и высушенной в отдельном вакуум-аппарате, получившей свой номер, номер государственного контроля и оформленной одним документом о качестве.
2.2. Каждая серия вирусвакцины должна быть принята (проверена) государственным контролером Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветпрепаратов.
2.3. Для контроля качества препарата от каждой серии отбирают 50 ампул или флаконов вакцины.
2.1-2.3. (Измененная редакция, Изм. N 2).
2.3а. Определение иммуногенности проводят периодически на каждой десятой серии вакцины.
(Введен дополнительно, Изм. N 1).
2.4. При получении неудовлетворительных результатов испытаний хотя бы по одному из показателей по нему проводят повторные испытания на удвоенном количестве ампул, отобранных от той же серии культуральной сухой вирусвакцины ВГНКИ, удваивая количество испытаний по каждому показателю.
2.5. Контроль качества определенной серии препарата по требованию потребителя проводит государственный контролер на предприятии-изготовителе или Всесоюзный государственный научно-контрольный институт ветеринарных препаратов.
(Измененная редакция, Изм. N 2).
3. МЕТОДЫ ИСПЫТАНИЙ
3.1. Метод отбора проб
3.1.1. Ампулы отбирают из разных мест упаковочной единицы. 25 ампул или флаконов вирусвакцины используют для проведения испытаний, а остальные хранят в архиве государственного контролера.
(Измененная редакция, Изм. N 2).
3.2. Внешний вид, наличие или отсутствие посторонней примеси, изменение консистенции определяют визуально.
3.3. Определение остаточной влажности — по ГОСТ 24061-80*.
______________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ 24061-89. — Примечание изготовителя базы данных.
(Измененная редакция, Изм. N 1).
3.3.1-3.3.3. (Исключеы, Изм. N 1).
3.4. Растворимость вирусвакцины определяют, растворяя содержимое ампулы в 10 см физиологического раствора.
После встряхивания препарат должен полностью раствориться в течение 2-3 мин.
(Измененная редакция, Изм. N 1).
3.5. Определение стерильности
3.5.1. Аппаратура, материалы и реактивы
Для проведения испытания применяют:
термостат с температурой нагрева 37-38 °С;
автоклав;
флаконы вместимостью 100 см;
пипетки по ГОСТ 20292-74*;
________________
* На территории Российской Федерации действуют ГОСТ 29169-91, ГОСТ 29227-91-ГОСТ 29229-91, ГОСТ 29251-91-ГОСТ 29253-91, здесь и далее по тексту. — Примечание изготовителя базы данных.
пробирки стеклянные по ГОСТ 25336-82;
воронки стеклянные;
пробки ватномарлевые;
пептон сухой ферментативный по ГОСТ 13805-76;
агар микробиологический по ГОСТ 17206-84*;
______________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ 17206-96. — Примечание изготовителя базы данных.
бульон мясопептонный по ГОСТ 20730-75;
раствор Хенкса (рабочий);
0,5%-ный раствор гидролизата лактальбумина — среду ГЛА;
вазелин медицинский по ГОСТ 3582-84;
глюкозу по ГОСТ 975-75*.
______________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ 975-88. — Примечание изготовителя базы данных.
(Измененная редакция, Изм. N 1).
3.5.2. Подготовка к испытанию
Готовят в соответствии с действующей рецептурой мясопептонный агар (МПА) с 1% глюкозы, мясопептонный бульон (МПБ) с 1% глюкозы, мясопептонный печеночный бульон (МППБ) под вазелиновым маслом (среда Китт-Тароцци), среду Сабуро. Среды разливают по 8-10 см в пробирки и по 50 см во флаконы, закрывают ватномарлевыми пробками и пергаментными колпачками и стерилизуют в автоклаве в течение 30 мин при 0,15 МПа.
(Измененная редакция, Изм. N 1).
3.5.3. Проведение испытания
Пять ампул или флаконов сухой вирусвакцины отдельно растворяют в растворе Хенкса или в среде ГЛА. Для этого в каждую ампулу или флакон, содержащие до лиофилизации 2 см вакцины, добавляют 10 см раствора, а в ампулу или флакон, содержащий до лиофилизации 4 см вакцины, добавляют 20 см раствора рН 7,2. Затем производят посев из каждой ампулы или флакона вирусвакцины в количестве 0,3-0,5 см в пробирки с МПА с 1% глюкозы, со средой Сабуро, с МПБ с 1% глюкозы и МППБ под вазелиновым маслом и во флаконы в количестве 2-5 см с МПБ и МППБ. Посевы производят в две пробирки и в один флакон с каждой средой из одной ампулы или флакона вирусвакцины. Питательные среды с посевами выдерживают в течение 10 сут в термостате при 37-38 °С (для агара Сабуро — 20-22 °С). В питательных средах с посевами не должно быть роста бактериальной микрофлоры и грибов.
(Измененная редакция, Изм. N 1, 2).
3.6. Определение активности вакцины по титру инфекционности в культуре клеток куриных эмбрионов
3.6.1. Оборудование и реактивы
Для проведения испытания применяют:
колбы мерные вместимостью 10 и 100 см по ГОСТ 1770-74 или флаконы вместимостью 10 и 100 см;
пипетки по ГОСТ 20292-74;
раствор Хенкса (рабочий).
(Измененная редакция, Изм. N 1).
3.6.2. Подготовка к испытанию
Берут пять ампул или флаконов вакцины. Готовят десятикратные разведения вирусвакцины в растворе Хенкса, как указано в п.3.5.3. После тщательного перемешивания, получив разведение вакцины 10, 1 см этого разведения вносят во второй флакон (колбу) с 9 см раствора Хенкса, тщательно перемешивают, затем из второго флакона (колбы) берут 1 см раствора и вносят в третий, содержащий 9 см раствора Хенкса, и так далее, до восьмого флакона (колбы), получая последовательно разведения: 10, 10, 10, 10, 10, 10, 10, 10.
(Измененная редакция, Изм. N 1, 2).
3.6.3. Проведение испытания
Вакциной каждого разведения заражают не менее четырех пробирочных культур клеток куриных эмбрионов. Окончательный учет результатов титрования вакцины проводят через 120 ч после заражения. Титр инфекционности вакцины (ТЦД) определяют по методу Рида
и Менча.
3.7. Определение активности вакцины по титру инфекционности для кроликов
3.7.1. Готовят последовательно разведения вирусвакцины 10, 10, 10, 10, 10, 10, как указано в п.3.6.2. Для разведения вакцины можно использовать раствор Хенкса или стерильный физиологический раствор с рН 7,0-7,2.
Пользуясь одним шприцом, вакцину вводят кроликам массой (2,0±0,1) кг внутримышечно в область наружной стороны бедра от большего разведения к меньшему:
четырем кроликам — по 1 см в разведении 10;
четырем кроликам — по 1 см в разведении 10;
четырем кроликам — по 1 см в разведении 10;
четырем кроликам — по 1 см в разведении 10.
Наблюдение за привитыми кроликами ведут в течение 10 сут.
Титр инфекционности вирусвакцины для кроликов определяют по методу Рида и Менча.
(Измененная редакция, Изм. N 1).
3.8. Испытание на авирулентность и иммуногенность
3.8.1. Авирулентность каждой серии вакцины проверяют на двух овцах не ниже средней упитанности в возрасте 1-5 лет.
Вакцину разводят стерильным физиологическим раствором в зависимости от ее активности по титру инфекционности для кроликов.
Вакцину с титром инфекционности для кроликов 10 ЛКД разводят 1:25, 10 ЛКД — 1:50, 10 ЛКД — 1:250.
Для получения разведения 1:25 вакцину из ампулы, объем которой до лиофилизации составлял 2 см, растворяют в 25 см физиологического раствора, объем которой составлял 4 см — в 50 см.
Для получения разведения 1:50 вакцину из ампулы, объем которой до лиофилизации был равен 2 или 4 см, растворяют соответственно в 50 или 100 см физиологического раствора.
Для получения разведения 1:250 вакцину из ампулы, объем которой до лиофилизации был равен 2 или 4 см, растворяют соответственно в 250 или 500 см физиологического раствора.
Для определения авирулентности разведение вакцины, приготовленное в соответствии с ее активностью по титру инфекционности для кроликов, вводят овцам подкожно в области внутренней стороны бедра в дозе 2 см.
За иммунизированными животными ведут наблюдение в течение 20 сут с ежедневным измерением температуры тела утром и вечером. Вакцинированные животные за период наблюдения не должны иметь клинических признаков заболевания и отклонений от физиологической нормы. Допускается у привитых животных повышение температуры тела на 1 °С в течение 3-5 сут после введения вакцины.
На иммуногенность проверяют каждую десятую серию вакцины на 18 овцах не ниже средней упитанности в возрасте 1-5 лет.
В зависимости от активности вакцины по титру инфекционности для кроликов готовят 4 десятикратных разведения, содержащих 0, 1, 10 и 100 ЛКД вируса. Если активность вакцины по титру инфекционности для кроликов равна 10 ЛКД, то в разведении вакцины 10 содержится 1 ЛКД вируса, в разведении 10 — 10 ЛКД, а в разведении 10 — 0.
Одним шприцем, начиная от большего разведения к меньшему, вводят 16 овцам подкожно с внутренней стороны бедра по 1 см соответствующего разведения вакцины. Каждое разведение вакцины проверяют на 4 овцах.
Через 20-25 сут иммунизированным и двум контрольным (интактным) овцам вводят подкожно 200 ЛКД вирулентного вируса в объеме 1 см.
Наблюдение за животными ведут в течение 15 сут с измерением температуры тела два раза в день (утром и вечером).
Результаты титрования учитывают по гибели овец в течение 15 сут наблюдения.
50%-ная иммунизирующая доза вакцины (ИмД) не должна превышать 5 ЛКД.
Иммуногенную активность вакцины () в ИмД вычисляют по формуле
,
где — логарифм наименьшего разведения, обеспечивающего 100%-ный (или максимальный) защитный (положительный) эффект, взятый с противоположным знаком;
— логарифм кратности разведения, равный единице;
— сумма долей положительного эффекта, начиная с ;
0,5 — постоянный коэффициент.
Пример 1. При определении иммуногенности вакцины в опыте на овцах получены результаты, приведенные в табл.2.
Таблица 2
Разведение вакцины | Обратный логарифм разведения | Число животных на разведение | Число животных с положительным эффектом | Доля животных с положительным эффектором | ||
10 | 3 | 4 | 4 | 1,0 | ||
10 | 4 | 4 | 3 | 0,75 | ||
10 | 5 | 4 | 0,00 | |||
=1,75 |
ИмД, (50%-ная иммунизирующая доза для овец).
Это значит, что в 1 см вакцины, разведенной до исходного (перед лиофилизацией) объема, содержится 17780 ИмД.
Пример 2. При определении иммуногенности вакцины получены результаты, приведенные в табл.3.
Таблица 3
Разведение вакцины | Обратный логарифм разведения | Число животных на разведение | Число животных с положительным эффектом | Доля животных с положительным эффектором | ||
10 | 4 | 4 | 3 | 0,75 | ||
10 | 5 | 4 | 2 | 0,50 | ||
10 | 6 | 4 | 0,00 | |||
=1,25 |
ИмД.
Это значит, что в 1 см вакцины, разведенной до исходного (перед лиофилизацией) объема, содержится 56230 ИмД.
Для определения соотношения в вакцине ИмД и ЛКД необходимо количество ЛКД, содержащееся в 1 см данной серии вакцины, разделить на количество ИмД.
Пример 3. ИмД=17780 ИмД.
Инфекционная активность () для кроликов равна 10 ЛКД=10000 ЛКД.
.
Пример 4. ИмД=56230 ИмД;
=10 ЛКД=100000 ЛКД.
.
50%-ная иммунизирующая доза вакцины не должна превышать 5 ЛКД.
(Измененная редакция, Изм. N 1).
3.9. Определение вакуума
Наличие вакуума в ампулах проверяют аппаратом Д’Арсонваля или другим аппаратом.
(Введен дополнительно, Изм. N 2).
4. УПАКОВКА, МАРКИРОВКА, ТРАНСПОРТИРОВАНИЕ И ХРАНЕНИЕ
4.1. Вируссодержащую жидкость смешивают в соотношении 1:1 со средой высушивания и фасуют в стерильные ампулы по ОСТ 64-2-485-85* по 2 и 4 см или флаконы по ТУ 64-2-10-87. Ампулы и флаконы замораживают при температуре минус 40 °С и подвергают л