Определение ферментов в крови с целью диагностики болезней

ТОП 10:

Ферменты, катализирующие одну и ту же химическую реакцию, но отличающиеся по первичной структуре белка, называют изофермен-тами, или изоэнзимами. Они катализируют один и тот же тип реакции с принципиально одинаковым механизмом, но отличаются друг от друга кинетическими параметрами, условиями активации, особенностями связи апофермента и кофермента. Природа появления изоферментов разнообразна, но чаще всего обусловлена различиями в структуре генов, кодирующих эти изоферменты. Следовательно, изоферменты различаются по первичной структуре белковой молекулы и, соответственно, по физико-химическим свойствам. На различиях в физико-химических свойствах основаны методы определения изоферментов.

По своей структуре изоферменты в основном являются олигомерными белками. Причём та или иная ткань преимущественно синтезирует определённые виды протомеров. В результате определённой комбинации этих протомеров формируются ферменты с различной структурой — изомерные формы. Обнаружение определённых изоферментных форм ферментов позволяет использовать их для диагностики заболеваний.

Фермент лактатдегидрогеназа (ЛДГ) катализирует обратимую реакцию окисления лактата (молочной кислоты) до пирувата (пировиноградной кислоты). Повышение активности наблюдают при острых поражениях сердца, печени, почек, а также при мегалобластных и гемолитических анемиях. Однако это указывает на повреждение лишь одной из перечисленных тканей.

Креатинкиназа (КК) катализирует реакцию образования креатинфосфата. Определение активности КК в плазме крови имеет диагностическое значение при инфаркте миокарда (происходит повышение уровня МВ-изоформы). Количество изоформы ММ может повышаться при травмах и повреждениях скелетных мышц. Изоформа ВВ не может проникнуть через гематоэнцефалический барьер, поэтому в крови практически не определяется даже при инсультах и диагностического значения не имеет.

10. Органная специфичность изоферментов ЛДГ. Физиологические значения общей активности лактатдегидрогеназы и ее изоферментов в плазме крови. Диагностическая значимость определения активности ЛДГ и ее изоферментов.

Лактатдегидрогеназа является гликолитическим ферментом и катализирует следующую реакцию: Лактат + НАД Лактатдегидрогеназа Пируват + НАДН

Молекула ЛДГ представляет собой тетрамер, состоящий из одного или двух типов субъединиц, обозначаемых как M (мышцы) и H (сердце). В сыворотке крови фермент существует в пяти молекулярных формах, различающихся по первичной структуре, кинетическим свойствам, электрофоретической подвижности (ЛДГ‑1 быстрее движется к аноду по сравнению с ЛДГ‑5, то есть более электрофоретичеки подвижна). Каждая форма имеет характерный полипептидный состав: ЛДГ‑1 состоит из 4 H‑субъединиц, ЛДГ‑2 — из 3 H‑субъединиц и 1 M‑субъединицы, ЛДГ‑3 представляет собой тетрамер из 2 H‑субъединиц и 2 M‑субъединиц, ЛДГ‑4 содержит 1 H‑субъединицу и 3 M‑субъединицы, ЛДГ‑5 состоит только из M‑субъединиц. По степени убывания общей каталитической активности энзима все органы и ткани располагаются в следующем порядке: почки, сердце, скелетные мышцы, поджелудочная железа, селезенка, печень, легкие, сыворотка крови.

От того, какой изофермент наиболее представлен, зависит преимущественный способ окисления глюкозы в ткани: аэробный (до CO2 и H2O) или анаэробный (до молочной кислоты). Подобное различие обусловлено разной степенью сродства изоферментов к пировиноградной кислоте. Изоферменты, содержащие в основном H‑субъединицы (ЛДГ‑1 и ЛДГ‑2), обладают низким сродством к пирувату и поэтому неспособны эффективно конкурировать за субстрат с пируватдегидрогеназным комплексом. В результате пируват подвергается окислительному декарбоксилированию и в виде ацетил‑КоA вступает в цикл Кребса.

Напротив, изоферменты, обладающие главным образом M‑субъединицами (ЛДГ‑4 и ЛДГ‑5), имеют более высокое сродство к пирувату и, как следствие, превращают его в молочную кислоту. Для каждой ткани установлены наиболее типичные изоферменты. Для миокарда и мозговой ткани основным изоэнзимом является ЛДГ‑1, для эритроцитов, тромбоцитов, почечной ткани — ЛДГ‑1 и ЛДГ‑2. В легких, селезенке, щитовидной и поджелудочной железах, надпочечниках, лимфоцитах преобладает ЛДГ‑3. ЛДГ‑4 находится во всех тканях с ЛДГ‑3, а также в гранулоцитах и мужских половых клетках, в последних дополнительно обнаруживается ЛДГ‑5. В скелетных мышцах изоферментная активность располагается в порядке убывания в ряду: ЛДГ‑5, ЛДГ‑4, ЛДГ‑3. Для печени наиболее характерен изофермент ЛДГ‑5, выявляется также ЛДГ‑4.

В норме основным источником активности ЛДГ в плазме крови являются разрушающиеся клетки крови. В сыворотке активность изоферментов распределяется следующим образом: ЛДГ‑2 > ЛДГ‑1 > ЛДГ‑3 > ЛДГ‑4 > ЛДГ‑5. При электрофорезе между фракциями ЛДГ‑3 и ЛДГ‑4 иногда обнаруживается дополнительная полоса изофермента ЛДГ‑X, данный изофермент локализован в тех же органах, что и ЛДГ‑5.

Все заболевания, протекающие с разрушением клеток, сопровождаются резким повышением активности ЛДГ в сыворотке крови. Нарастание общей активности фермента обнаруживается при таких заболеваниях как инфаркт миокарда, некротическое поражение почек, гепатит, панкреатит, воспаление и инфаркт легкого, опухоли различной локализации, повреждения, дистрофия и атрофия мышц, гемолитические анемии и физиологическая желтуха новорожденных, лимфогранулематоз, лейкозы. При инфаркте миокарда начало роста активности фермента в сыворотке крови отмечается на 8‑10 час от момента приступа, максимальное увеличение наступает к 24‑48 часу, нередко в 15‑20 раз превышая норму. Повышенная активность ЛДГ сохраняется до 10‑12 суток от начала заболевания. Степень нарастания активности фермента не всегда коррелирует с размерами поражения сердечной мышцы и для прогноза исхода заболевания может являться лишь ориентировочным фактором. У больных стенокардией активность фермента не изменяется, что позволяет применять тест для дифференциальной диагностики в пределах 2‑3 суток после сердечного приступа. Наличие органной специфичности ферментов позволяет применять исследование их активности с целью топической диагностики.

11. Физиологические значения общей активности креатининкиназы (КК) и ее изоферментов в плазме крови. Диагностическая значимость определения активности КК и ее изоферментов.

Креатинкиназа (КК) – это фермент, природный катализатор химических реакций, значительно увеличивающий скорость преобразования креатина и АТФ (аденозинтрифосфат) в высокоэнергетическое соединение креатинфосфат, который расходуется при интенсивных мышечных сокращениях. Данный фермент содержится в цитоплазме клеток различных мышц (сердечной, скелетных), а также в клетках мозга, легких, щитовидной железы.

Молекулу креатинкиназы можно поделить на две части, каждая из которых реализуется в виде отдельной субъединицы: М (мышца), и B (мозг). Данные субъединицы в организме человека могут объединяться вместе тремя способами, образуя, соответственно, три изоформы креатинкиназы: ММ, МВ и ВВ. Эти изоферменты отличаются своей локализацией в организме человека: креатинкиназа ММ расположена в миокарде и скелетных мышцах; креатинкиназа МВ локализована в большей степени в миокарде; креатинкиназа ВВ содержится в клетках плаценты, головного мозга, мочевыводящих путей, некоторых опухолях и других местах.

Нормальная концентрация фермента напрямую зависит от возраста и пола человека. В связи с активным развитием мускулатуры и нервной системы, у детей активность природного катализатора повышена по отношению к активности у взрослых. У женщин креатинкиназа ниже, чем у мужчин.

Уровень изофермента ММ оказывается повышен в большей степени в результате повреждений мышц, и редко при повреждениях сердца. Содержание КК МВ связано с повреждением миокарда. Значительное увеличение активности данной формы наблюдается при инфаркте миокарда. Ее уровень резко возрастает уже через два — четыре часа после первых симптомов. Поэтому концентрация данного фермента в крови активно используется для определения инфаркта миокарда. Однако, стоит отметить, что содержание КК МВ возвращается к нормальному уровню по прошествии трех-шести дней, что обуславливает низкую эффективность диагностики на поздних сроках. Концентрация КК ВВ увеличивается при онкологических заболеваниях. Снижение уровня изоферментов не несет никакой диагностической ценности, так как минимальный порог содержания КК у здорового человека равен нулю.

12. Липазы плазмы крови. Диагностическая значимость определения активности липазы.Липаза — синтезируемый человеческим организмом водорастворимый фермент, катализирующий гидролиз нерастворимых эстеров (липидных субстратов) и способствующий перевариванию, растворению и фракционированию нейтральных жиров. Вместе с желчью липаза стимулирует переваривание жиров, жирных кислот, жирорастворимых витаминов А, Е, D, К, трансформируя их в энергию и тепло. Назначением липопротеинлипазы является расщепление триглицеридов (липидов) в липопротеинах крови, благодаря чему обеспечивается доставка жирных кислот к тканям. Липазу вырабатывают: поджелудочная железа; печень; легкие; кишечник особые железы, расположенные в ротовой полости детей грудного возраста. В последнем случае синтезируется так называемая лингвальная липаза. Каждый из перечисленных ферментов способствует расщеплению определенной группы жиров.

С точки зрения значимости при постановке диагноза важную роль играет липаза, вырабатываемая поджелудочной железой. Повышение уровня фермента отмечается при: панкреатите, протекающем в острой форме, или при обострении хронического процесса; желчных коликах; травме поджелудочной железы; наличии в поджелудочной железе новообразований; хронических патологиях желчного пузыря; образовании кисты или псевдокисты в поджелудочной железе; закупорке панкреатического протока рубцом или камнем; внутрипеченочном холестазе; острой кишечной непроходимости; инфаркте кишечника; перитоните; прободении язвы желудка; перфорации внутреннего (полого) органа; острой или хронической почечной патологии; эпидемическом паротите, при котором происходит поражение поджелудочной железы; нарушениях обменных процессов, имеющих место при сахарном диабете, ожирении или подагре; циррозе печени; длительном приеме медицинских препаратов – в частности, барбитуратов, анальгетиков наркотического ряда, гепарина, индометацина; операции по трансплантации органов. В редких случаях процесс активизации липазы оказывается связанным с некоторыми травмами – например, переломами трубчатых костей. Но в этом случае колебания уровня фермента в крови не могут считаться специфическим показателем наличия физического повреждения. По этой причине анализы на липазу не учитываются при диагностике травм различного происхождения.

Определение уровня липазы в сыворотке обретает особую важность при любом поражении поджелудочной железы. В этом случае анализ крови на содержание данного энзима вместе с анализом на амилазу (фермент, способствующий расщеплению крахмала до олигосахаридов) с высокой степенью достоверности указывает на наличие патологического процесса в тканях поджелудочной железы: оба показателя оказываются выше нормы). В процессе нормализации состояния больного названные ферменты возвращаются к адекватным показателям не одновременно: как правило, уровень липазы остается на высоком уровне дольше, чем уровень амилазы.

Высокий уровень липазы сохраняется от 3 до 7 суток с начала развития воспаления. Тенденция к снижению фиксируется только спустя 7-14 дней.

Низкий уровень липазы фиксируется: при наличии злокачественного новообразования в любой части организма, кроме самой поджелудочной железы; вследствие снижения функции поджелудочной железы; при кистозном фиброзе (муковисцидозе) – генетическом заболевании с тяжелым течением, возникающем в результате патологического поражения желез внешней секреции (ЖКТ, легких). после оперативного вмешательства по удалению поджелудочной железы; при избыточном содержании триглицеридов в крови, возникающем по причине неправильного питания с обилием жирных продуктов в рационе или вследствие наследственной гиперлипидемии. В некоторых случаях снижение уровня липазы является маркером перехода панкреатита в хроническую форму.



Диагностическая
ценность ферментов существенно 
повысилась после внедрения в 
клиническую практику методов определения 
изоферментов, различающихся преимущественно 
разной электрофоретической подвижностью,
хотя и наделенных одинаковой биологической 
активностью. В этой связи следует 
более подробно рассмотреть диагностическую 
значимость двух ферментов, определение 
изоферментных спектров которых 
внедрено почти во всех лабораториях
клинической химии мира.

Первым из них 
является упоминавшаяся выше лактатдегидрогеназа
(ЛДГ), которая катализирует обратимое 
превращение пировиноградной кислоты 
в молочную кислоту по уравнению

Следует подчеркнуть,
что ЛДГ является ключевым ферментом 
анаэробного обмена углеводов во
всех живых организмах, определяя 
скорость образования энергии в 
виде аденозинтрифосфата (АТФ).

ЛДГ — широко распространенный
фермент, он синтезируется почти 
во всех клетках организма человека
[3]; различают два типа ЛДГ: так 
называемый сердечный тип, обозначаемый
H-тип (от англ. heart), и мышечный тип, обозначаемый
M-тип (от англ. muscle); каждый из них состоит 
из четырех субъединиц, обозначаемых
соответственно цифрами. Если в молекуле
ЛДГ все четыре субъединицы представлены
H-типом, ее обозначают ЛДГ H4 ; если все 
субъединицы составлены из M-типа, тогда 
фермент обозначают M4 . Поскольку 
в клетках всегда содержатся оба 
типа молекул H и M, суммарно четыре субъединицы 
строятся как из H-, так и из M-типов.
Таким образом, различают 5 изоферментов
ЛДГ, составленных из следующих типов
H и M:

H4 , H3M1 , H2M2 , H1M3 и 
M4 ;

соответственно 
они обозначаются: 1-, 2-, 3-, 4- и 5-й изоферменты 
ЛДГ.

При органическом
поражении сердечной мышцы, например
при инфаркте миокарда, в сыворотке 
крови резко повышается уровень 
не только общей лактатдегидрогеназы,
но, что очень важно для точности
диагноза, это повышение преимущественно 
обусловлено изоферментами 1 и 2, соответственно
H4 и H3M1 .

С другой стороны,
при поражениях скелетной мускулатуры,
а также при воспалительных процессах 
печени (гепатиты) или при вирусных
поражениях ткани печени [4], и наконец,
при отравлении четыреххлористым углеродом 
или другими ядами, когда преимущественно 
поражается печень, вызывая некроз
ткани [3, 4], изоферментный спектр перемещается
слева направо (то есть уровни 5 и 4 изоферментов
ЛДГ резко повышаются при почти 
неизмененном уровне 1 и 2 изоферментов).
Эти результаты очень важны для 
лечащего врача, который на основании 
главным образом клинической 
картины болезни, лабораторных данных,
электрофоретической картины спектров
ЛДГ ставит окончательный диагноз 
и приступает к лечению больного.
Естественно, что методы лечения 
будут резко отличаться, и в 
выборе этих методов немалую роль
играет изоферментный спектр ЛДГ 
сердечного или мышечного типа.

Вторым ферментом,
диагностическая ценность которого
еще выше, в особенности при 
инфаркте миокарда [3, 4], является креатинфосфокиназа
(КФК), катализирующая биосинтез креатинфосфата
из креатина и АТФ в соответствии
с уравнением

Креатинфосфокиназа
— ключевой фермент биосинтеза макроэргического
(наделенного или содержащего 
высокий энергетический потенциал)
субстрата — креатинфосфата, играющего 
наряду с АТФ выдающуюся роль в 
биоэнергетике сердечной мышцы 
и всего организма. Оказалось, что 
молекула КФК также состоит из
двух типов субъединиц: из M-типа (то
есть мышечный тип, от англ. muscle) и B-типа
(то есть мозговой; от англ. brain); соответственно
выделены и охарактеризованы три 
изофермента КФК, которые обозначаются
латинскими буквами: MM-изофермент (мышечный
тип), преимущественно характерный 
для поперечно-полосатой мускулатуры,
BB-изофермент (мозговой тип, преимущественно 
содержится в ткани мозга) и смешанный 
тип, обозначаемый MB-изоферментом, который 
содержится только в сердечной мышце.

Учитывая эти 
данные, в частности органотропность 
изоферментов КФК, при органических
или функциональных поражениях этих
тканей в сыворотке крови больного
появляются в норме отсутствующие 
изоферменты КФК, и, соответственно,
они открываются при электрофорезе.

На нашей кафедре 
В.П. Сараев и Ф.Б. Левин исследовали 
сыворотку крови больных инфарктом 
миокарда в динамике с первого 
часа наступления болезни и показали,
что общая активность ЛДГ резко повышается
уже через 0,5 часа и держится на этом высоком
уровне до 2 — 3 дней, а у отдельных больных
— до 4 дней; после острого периода величины
ЛДГ быстро приходят к норме, хотя изоферментный
спектр ЛДГ все еще сохраняет сердечный
тип до 7 — 8 суток. Укажем также, что во всех
случаях инфактов миокарда, включая благополучные
случаи, В.П. Сараев и Ф.Б. Левин определяли
активность еще одного фермента — гамма-глутамилтрансферазы
— в сыворотке крови. Оказалось, что активность
этого фермента медленно повышается при
наступлении инфаркта, но высокие уровни
его появляются в крови только на 10 — 14-е
сутки после наступления инфаркта. По
мнению многих клиницистов, гамма-глутамилтрансферазный
тест сыворотки крови может служить важным
постинфарктным ферментным тестом. Имеющиеся
данные свидетельствуют о том, что некротизированная
зона сердечной мышцы скорее всего не
является источником гамма-глутамилтрансферазы,
поскольку вымывание ткани при инфаркте
наступает уже в первые 10 — 15 минут. Более
вероятно предположение, что в процессе
заживления и заполнения некротизированной
зоны нормальной мышечной тканью в постинфарктном
периоде происходит усиленная васкуляризация
(развитие сосудистой сети); в эндотелии
образующихся в этой зоне сосудов открыто
повышенное количество (по активности)
гамма-глутамилтрансферазы, что, по-видимому,
может служить источником повышенного
содержания этого фермента в сыворотке
крови больных инфарктом миокарда.

Диагностическая
энзимология достигла значительных
успехов при постановке диагноза
болезней не только указанных органов,
но и других, в частности почек,
поджелудочной железы, желудка, кишечника
и легких. Широко используют в клинической
практике, например, определение трансамидиназы
в сыворотке крови — фермента, открытого
только в ткани почек и поджелудочной
железы; или определяют активность фермента
гистидазы, обнаруженного только в клетках
печени и эпидермиса кожи. Соответственно,
при органических поражениях этих органов,
воспалительных процессах, травмах, хирургических
вмешательствах в сыворотке крови больных
появляются указанные ферменты, в норме
отсутствующие в сыворотке.

Естественно, что 
здесь представлены лишь отдельные 
примеры из большого числа ферментов,
определяемых в клинике, и описаны 
только некоторые болезни из известных 
почти 10 тысяч болезней человека. Однако
и из этих примеров можно сделать 
заключение, что ферментная диагностика 
может служить основой не только
для постановки правильного и, что 
самое главное, своевременного диагноза
болезни, но и для проверки эффективности 
применяемого метода лечения.

Обладая высокой 
специфичностью действия, ферменты применяются 
в качестве самых тонких и избирательных 
инструментов в направленном воздействии
на течение любой патологии. О степени
поражения органов, биомембран клеток
и субклеточных структур, о тяжести патологического
процесса можно судить по появлению (или
резкому повышению уровня) органотропных
ферментов и изоферментов в сыворотке
крови больных, что составляет предмет
диагностической энзимологии.

Ферменты 
в диагностике 
заболеваний сердечной 
мышцы. 
До настоящего времени определение активности
ферментов широко использовалось для
подтверждения диагноза острого инфаркта
миокарда (ОИМ). В настоящее время на эту
роль претендует определение специфических
сердечных маркеров – тропонина Т или
тропонина I. Несмотря на это, определение
изоформ креатинкиназы или ее изофермента
КК-МВ остается применимым для ранней
диагностики ОИМ – в пределах 12 часов
от начала заболевания. В этот период диагностическая
чувствительность определения не намного
уступает чувствительности определения
TnT. Наряду с определением уровня тропонина,
определение изоформ КК-ММ и КК-МВ позволяет
следить за восстановлением коронарного
кровотока на ранней стадии инфаркта миокарда.
Определение изоформ КК может быть использовано
для оценки времени начала ОИМ, когда клинические
данные не позволяют выявить его точно. 
 
Определение активности изофермента КК-МВ
имеет преимущество по сравнению с определением
тропонина из-за возможности круглосуточного
определения, простоты и скорости определения
и относительно низкой стоимости. 
 
Продолжает обсуждаться значимость определения
активности в сыворотке изофермента ВВ
гликогенфосфорилазы для диагностики
ОИМ. Его активность может изменяться
в сыворотке уже через два часа после начала
ОИМ. Использование данного теста на практике
ограничено сложными методическими проблемами. 
 
Ферменты в диагностике
заболеваний печени 
Более четырех десятилетий для диагностики
заболеваний печени используют АсАТ, АлАТ,
ЩФ. За 30-летний период использования в
качестве маркера γ-глютамилтрансферазы
(ГГТ) установлена ценность определения
ее активности для скрининга заболеваний
печени, метастазирования в печень и злоупотребления
алкоголем. Увеличение активности ферментов,
особенно АлАТ и ГГТ, может наблюдаться
при жировой дистрофии печени, отмечается
у 15% пациентов с повышенной массой тела
и у больных гепатитом C. Увеличение активности
АлАТ является своеобразным маркером
при скрининге гепатита C среди населения.
Определение активности катионной B-формы
глутатион-S-трансферазы – фермента, участвующего
в процессах детоксикации, является более
чувствительным маркером повреждения
печеночных клеток, чем определение активности
аминотрансфераз. В сочетании с определением
активности АлАТ чувствительность данного
теста для диагностики гепатита С увеличивается
до 80%. 
 
Ферменты в диагностике
заболеваний поджелудочной
железы 
Определение амилазы остается наиболее
часто используемым показателем для диагностики
острого панкреатита. Данный тест не был
полностью заменен определением активности
липазы, несмотря на более высокую специфичность.
При недостаточной функции поджелудочной
железы низкий уровень сывороточной панкреатической
изоамилазы – удобный, но малочувствительный
маркер нарушенной функции поджелудочной
железы. Данный диагноз может быть подтвержден
с высокой диагностической чувствительностью
(> 80%) путем определения химотрипсина
или панкреатической эластазы в кале. 
 
Ферменты при заболеваниях
скелетной мышцы 
Определение активности КК в сыворотке
остается наиболее доступным лабораторным
методом в диагностике миопатий. Определение
КК остается ценным в изучении генетически
обусловленных миопатий, особенно Дюшенна
и Беккера, несмотря на увеличивающееся
использование методов ДНК-диагностики.
Низкая стоимость и практически 100%-ная
чувствительность делает определение
КК предпочтительным для скрининга новорожденных,
постановки или исключения доклинического
диагноза. Определение КК остается полезным
для выявления женщин-носителей как дополнение
к ДНК-диагностике. Определение активности
КК получило распространение для выявления
повреждения мышц лекарственными препаратами,
особенно гиполипидемическими препаратами. 
 
Ферменты при заболеваниях
костной системы 
Разработка простых и специфичных методов
для определения костной фракции ЩФ привела
к повышению чувствительности и специфичности
определения этого фермента для диагностики
заболеваний костной системы. Костная
ЩФ продолжает использоваться для оценки
деятельности остеобластов, и оказалось,
что ее активность более полно отражает
эти процессы, чем другие маркеры, при
болезни Педжета и метастазах опухолей
в кости. В связи с этим определение активности
фермента может иметь определенную ценность
для скрининга населения с целью выявления
остеопороза. 
 
Ферменты в диагностике
заболеваний предстательной
железы 
Простатическая кислая фосфатаза (КФ)
в сыворотке, определенная с использованием
ингибитора – тартрата или более современным
иммуноферментным методом длительное
время использовалась для диагностики
опухолей предстательной железы. В настоящее
время в большинстве лабораторий применяют
более чувствительный метод – определение
простатспецифичного антигена (PSA). 
 
Интерес к применению ферментов в диагностике
не ограничивается сывороточными ферментами.
Определение ферментативной активности
проводят в таких биологических жидкостях,
как спинномозговая, моча, амниотическая,
синовиальная и др., а также в клетках крови
и других тканей при исследовании биопсийного
материала. 
 

ЛИТЕРАТУРА

1. Браунштейн
   А.Е. На стыке химии и биологии. М., 1987.
2. Мардашев
   С.Р. Биохимические проблемы медицины.
   М., 1975.
3. Зильва М.,
   Пэннел Г. Клиническая химия в диагностике
   и лечении. М.: Медицина, 1984.
4. Панченко
   Н.И., Гусева Н.Р., Масленникова Н.К. и др.
   // Лаб. диагностика. 1993. № 4. С. 37 — 41.
5. https://bio.fizteh.ru/student/files/biology/bioarticles/ferment_medecine.html
6. https://www.terramedica.spb.ru/ld2_2005/kozlov.htm

Министерство 
сельского хозяйства 
Российской Федерации

Департамент
научно – технологической 
политики и образования

ФГОУ 
ВПО «Санкт-Петербургская
Государственная Академия
Ветеринарной Медицины»

Кафедра 
органической и биологической
химии 

Реферат

на тему:

«Ферменты
в диагностике». 

                                                  
Выполнила:                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                                   
 

Санкт —
Петербург

2010